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酶的激活,膜的超极化是精卵融合后的第一个反应,使卵细胞产生连续脉冲二价 钙离子释放,激活卵子的成熟促进因子(MPF),从而激活MⅡ期的卵细胞 2.2ICSI过程中卵子的人工激活:ICSI时卵子不发生自然激活过程。显微注射 针穿刺卵膜将引发二钾钙离子的释放,在注射精子前回吸部分胞浆,以及将精子 推入胞浆后退针,这一系列的刺激对卵子产生激活作用,卵浆内的酶促进精细胞 的膜释放精子细胞溶解蛋白,可进一步激活卵子。另外,精子制动过程部分破坏 了精子尾部胞膜,确保精子进入卵母细胞胞浆后释放精子蛋白以激活卵母细胞。 3、具体操作方法 3.Ⅰ卵子的处理:在解剖镜下检出卵细胞,用培养液冲洗,判断其成熟度,然后 移入卵细胞培养液中,放入5%二氧化碳、37°C培养箱中培养4-6小时,于取 卵后4-6小时,用浓度为80KIUL的透明质酸酶消化卵丘,去卵丘后选择有第 极体的成熟卵母细胞进行ICSI授精 显微镜下收集到的卵子) 3.2精子的处理:如果精子活动度较好(大于5×10的六次方/m1)可采用上游 法;如整个 Makler计数器视野的精子数目<10条,则直接离心法;如冷冻精液 附睾或睾丸取精,一般采用微量 Percoll梯度离心法处理。注射前将处理好的精酶的激活,膜的超极化是精卵融合后的第一个反应,使卵细胞产生连续脉冲二价 钙离子释放,激活卵子的成熟促进因子(MPF),从而激活 MⅡ期的卵细胞。 2.2 ICSI 过程中卵子的人工激活:ICSI 时卵子不发生自然激活过程。显微注射 针穿刺卵膜将引发二钾钙离子的释放,在注射精子前回吸部分胞浆,以及将精子 推入胞浆后退针,这一系列的刺激对卵子产生激活作用,卵浆内的酶促进精细胞 的膜释放精子细胞溶解蛋白,可进一步激活卵子。另外,精子制动过程部分破坏 了精子尾部胞膜,确保精子进入卵母细胞胞浆后释放精子蛋白以激活卵母细胞。 3、具体操作方法 3.1 卵子的处理:在解剖镜下检出卵细胞,用培养液冲洗,判断其成熟度,然后 移入卵细胞培养液中,放入 5%二氧化碳、37°C 培养箱中培养 4-6 小时,于取 卵后 4-6 小时,用浓度为 80KIU/L 的透明质酸酶消化卵丘,去卵丘后选择有第一 极体的成熟卵母细胞进行 ICSI 授精。 (显微镜下收集到的卵子) 3.2 精子的处理:如果精子活动度较好(大于 5×10 的六次方/ml)可采用上游 法;如整个 Makler 计数器视野的精子数目<10 条,则直接离心法;如冷冻精液、 附睾或睾丸取精,一般采用微量 Percoll 梯度离心法处理。注射前将处理好的精
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