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实验步骤 )培养基的配制(MS+6-BA1mg/L+NA0.5mng/L 1、母液配制: MS培养基配方(mg/L) 1650 1900 大量元素(母液I) KH2PO4 170 20X MgS047H20 370 Cacl22H20 MnS04-4H20 22.3 ZnS04-7H20 8.6 微量元素(母液Ⅱ) H3B03 6.2 100X 0.83 NaMo042H20 CuS045H20 CoCl2-6H20 0.025 Fe盐(母液Ⅲ) FeS04 7H20 27.8 100X Na-EDTA 37.3 盐酸硫胺素VB1 0.4 有机物质(母液Ⅳ) 烟酸 VB5 0.5 100X 盐酸吡哆醇VB6 0.5 肌 100 30g/L 琼脂 8g/L 5.8 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进 行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的几十倍分别称量,配成浓缩液,这种浓 缩液叫做培养基母液。这样每次使用时,取其总量的几十分之一,加蒸馏水稀释,制 成培养液。大量元素母液倍数略低,一般为10~20倍,微量元素和有机成分一般为 50~100倍。 按照上表中的配方分别配制大量元素(母液Ⅰ)、微量元素(母液Ⅱ)、Fe盐(母 液Ⅲ)、有机物质(母液Ⅳ)。每种母液分别按表中各组分的量依次加入,中间不断 搅拌,使其溶解完全,最后定容。各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标 签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。 Fe盐(母液Ⅲ)的配制过程中应注意:将称好的FeSO47H2O和Na2EDTA2H2O 分别放到450mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合, 并将pH调至55,最后定容到1L,保存在棕色玻璃瓶中。 2、植物激素配制: 称取10 mg NAA,加入少量酒精,并加水定容50m(浓度为02mgm),称取50 mg6-BA,加少量的1 molL Hcl,使其充分溶解,然后加水至50m(浓度为1mg/m)。四、实验步骤 (一) 培养基的配制(MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.5mg/L) 1、母液配制: MS培养基配方(mg/L ) NH4NO3 1650 KNO3 1900 KH2PO4 170 MgSO4·7H2O 370 大量元素(母液Ⅰ) 20 X CaCl2·2H2O 440 MnSO4·4H2O 22.3 ZnSO4·7H2O 8.6 H3BO3 6.2 KI 0.83 NaMoO4·2H2O 0.25 CuSO4·5H2O 0.025 微量元素(母液Ⅱ) 100 X CoCl2·6H2O 0.025 Fe盐(母液Ⅲ) FeSO4·7H2O 27.8 100 X Na-EDTA 37.3 盐酸硫胺素VB1 0.4 烟酸 VB5 0.5 盐酸吡哆醇VB6 0.5 有机物质(母液Ⅳ) 100 X 肌醇 100 蔗糖 30g/L 琼脂 8g/L pH 5.8 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进 行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的几十倍分别称量,配成浓缩液,这种浓 缩液叫做培养基母液。这样每次使用时,取其总量的几十分之一,加蒸馏水稀释,制 成培养液。大量元素母液倍数略低,一般为10~20倍,微量元素和有机成分一般为 50~100倍。 按照上表中的配方分别配制大量元素(母液Ⅰ)、微量元素(母液Ⅱ)、Fe 盐(母 液Ⅲ)、有机物质(母液Ⅳ)。每种母液分别按表中各组分的量依次加入,中间不断 搅拌,使其溶解完全,最后定容。各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标 签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。 Fe 盐(母液Ⅲ)的配制过程中应注意:将称好的 FeSO4·7H2O 和 Na2-EDTA·2H2O 分别放到 450 mL 蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合, 并将 pH 调至 5.5,最后定容到 1 L,保存在棕色玻璃瓶中。 2、植物激素配制: 称取10 mg NAA,加入少量酒精,并加水定容50 ml (浓度为0.2 mg/ml),称取 50 mg 6-BA, 加少量的1 mol/L HCl,使其充分溶解,然后加水至50 ml (浓度为1 mg/ml)
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