3.051/BE.340 d.细胞分化测试 重要性: 在显型方面的变化使得功能专一特征化 通过蛋白合成、基因表达和分泌方面的改变表征其特性 2D凝胶电泳( SDS-PAGE)细胞蛋白基于质量和电荷不同而分离一提供一种细胞“信 方法 1.细胞溶解 2.通过使用等离子聚焦pl(等电位=净电荷为零处的pH值)使蛋白溶液分离 pH 9 i在E场中放入两性电解质混合物,在聚丙烯 酰胺凝胶中产生一个稳定的pH梯度 ⅱ加入蛋白溶液,E-场被重利用 i白扩散到各自的等电位点 p 3.凝胶被贴近以交叉形式放置在由十二烷基硫酸钠组成的第二层凝胶上。 4.SDS键合并使蛋白变性→自然电荷可忽略~ISDS每2氨基酸 电荷/质量≈常数4 3.051/BE.340 d. 细胞分化测试 重要性： - 在显型方面的变化使得功能专一特征化 - 通过蛋白合成、基因表达和分泌方面的改变表征其特性 2D 凝胶电泳（SDS—PAGE）：细胞蛋白基于质量和电荷不同而分离— 提供一种细胞“信 号” 方法 1． 细胞溶解 2． 通过使用等离子聚焦 pI(等电位=净电荷为零处的 pH 值)使蛋白溶液分离 3． 凝胶被贴近以交叉形式放置在由十二烷基硫酸钠组成的第二层凝胶上。 4． SDS 键合并使蛋白变性⇒ 自然电荷可忽略 ~ 1SDS 每 2 氨基酸。 电荷/质量≈常数 ⅰ.在 E 场中放入两性电解质混合物，在聚丙烯 酰胺凝胶中产生一个稳定的 pH 梯度 ⅱ.加入蛋白溶液，E-场被重利用 ⅲ.蛋白扩散到各自的等电位点