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实验二孚尔根反应( Feulgen reaction) Feulgen反应( Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者 Feulgen和 Rossenbeck于1924年发明,简称为 Feulgen法。因对DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显 示细胞内DNA的分布情况 实验目的 1.熟悉并掌握 Feulgen反应的原理及其实验操作方法 2.对细胞的免疫组化研究方法有一初步的认识 实验原理 自 Feulgen等发明该显示DNA的 Feulgen反应法以来,其作用机制也久经研究和讨论,现已取得一致 意见。其具体反应原理是,标本经稀盐酸水解后,DNA分子中的嘌呤碱基被解离,从而在核糖的一端岀现了 醛基。 Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应,形成含有醌基的化合物分子,因醌基为发色团,故可呈现出紫 红色。也就是说,DNA经稀酸水解后产生的醛基,具有还原作用,可与无色品红结合形成紫红色化合物,从 而显示出DNA的分布。其反应机制如下图所示 2HCI+Na2S205-2NaCl+SO2+H2SO3 实验用品 、器材显微镜20台、立式染色缸80个、水浴锅1台 二、材料香柏油5瓶,擦镜纸5本,镊子5把,盖玻片20片,用 carnoy"s固定液固定的肝脏 和精巢切片20片8 实验二 孚尔根反应(Feulgen Reaction) Feulgen 反应(Feulgen reaction)是显示 DNA 的最典型的组织化学反应,为学者 Feulgen 和 Rossenbeck 于 1924 年发明,简称为 Feulgen 法。因对 DNA 的显示反应具有高度专一性,故常被用来显 示细胞内 DNA 的分布情况。 实 验 目 的 1. 熟悉并掌握 Feulgen 反应的原理及其实验操作方法 2. 对细胞的免疫组化研究方法有一初步的认识 实 验 原 理 自 Feulgen 等发明该显示 DNA 的 Feulgen 反应法以来,其作用机制也久经研究和讨论,现已取得一致 意见。其具体反应原理是,标本经稀盐酸水解后,DNA 分子中的嘌呤碱基被解离,从而在核糖的一端出现了 醛基。Schiff 试剂中的无色品红可与醛基反应,形成含有醌基的化合物分子, 因醌基为发色团,故可呈现出紫 红色。也就是说, DNA 经稀酸水解后产生的醛基,具有还原作用,可与无色品红结合形成紫红色化合物,从 而显示出 DNA 的分布。其反应机制如下图所示。 2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3 实 验 用 品 一、器材 显微镜 20 台、立式染色缸 80 个、水浴锅 1 台。 二、材料 香柏油 5 瓶,擦镜纸 5 本,镊子 5 把,盖玻片 20 片,用 carnoy"s 固定液固定的肝脏 和精巢切片 20 片
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