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@泰山医学院 n Medical Universit 省级精品课程申报 讲授内容纲要、要求及时间分配(可加附页) 1,反相键合相色谱法 反相键合相色语法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。固定相常用「八烷 基桂坑键合相(0DS或C),流动相常用甲醇-水火乙腑-水。即流动相的极性大于固定相的 极性。反相色谱法主要用于分离非极性企中极性的各类分子型化合物, 2、正相键合相色语法 正相键合相色漂法是用极性固定相和非极性流动相组成的色谱体系。氰基与氨基是正相 键和色谱法常用的固定相,流动相常用正己杭加适量极性调整剂构成。正相色谱法主要用 于分离极性全强极性的各类分子型化合物。 第二节固定相和流动相的选择 一、固定相固定相是高效液相色谱法的关键组成部分,它直接关系的柱效与分离度。 1、液固色谱固定棉:具有吸附活性的吸附剂。如硅胶、氧化出和高分子多孔微求、分子筛 2、化学箍合相固定相:Si-0-C或si-0-Si-C 二、流动相 1、流动相的基本要求:不与固定相发生化学反应:对试样有适宜溶解度:必须与检测器相 适应:纯度高、粘度小。使用前用微孔滤膜过滤,还要脱气。2、流动相选择性三角形方法 (自学内容)3、洗脱方式:等度洗脱、梯度洗脱。 第二节高效液相色游仪 输液系统:高压输液和梯度洗脱装置。二、分离和进样系统:进样器和色谱柱。 三、检测系统:紫外检测器、荧光检测器、安培检测器、蒸发光散射检测器。四、数据记 录和处理系统。 第四节定性和定量方法 、定性方法:色谱法、化学鉴定法,色谱-光谱联用法(HPLC-MS,HPLC-R) 二、定量方法 1,外标法:以试样的对照品作对照物质,对比求算试样含量的方法。外标法可分为工作曲 线法和外标一点法。A心cn=么×C A 2、内标法:在样品中再加入一种纯物质作内标物,根据内标物与待测组分的定量校正因子。 内标物与样品的质量,求出样品中待测组分的合量。内标法分为工作曲线法、内标一点法 新用公式同气相色谱法
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