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离心方法 ()差速离心法一用于沉降系数相差一一几个数量级颗粒的分离。 缺点: a.分离效果差,不能一次得到纯颗粒,经再悬浮和再离心(2-3次),才能得到 较纯的颗粒。 b.壁效应严重,在离心管一侧会出现沉淀。 c.颗粒被挤压,可能变形,聚集而失活。 (2)梯度离心-用于相差较少(<20%)或分子量相差三倍的蛋白质。 优点: a.分离效果好,可一次获得较纯颗粒。 b.适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离 有一定浮力密度差的颗粒。 c.颗粒不会挤压变形。 缺点:离心时间较长;需要制备梯度;操作严格,不易掌握。 常用的方法有:蔗糖密度梯度离心;氯化铯等密度梯度离心。离心方法 (1) 差速离心法 --- 用于沉降系数相差一~几个数量级颗粒的分离。 缺点: a. 分离效果差,不能一次得到纯颗粒,经再悬浮和再离心(2~3次),才能得到 较纯的颗粒。 b. 壁效应严重,在离心管一侧会出现沉淀。 c. 颗粒被挤压,可能变形,聚集而失活。 (2) 梯度离心 ------ 用于相差较少(<20%)或分子量相差三倍的蛋白质。 优点: a. 分离效果好,可一次获得较纯颗粒。 b. 适应范围广,能象差速离心法一样分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离 有一定浮力密度差的颗粒。 c. 颗粒不会挤压变形。  缺点:离心时间较长;需要制备梯度;操作严格,不易掌握。  常用的方法有:蔗糖密度梯度离心;氯化铯等密度梯度离心
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