间点首先观察了缺糖对PC12细胞的损伤以及谷氨酰胺对细胞的保护作用,主要 进行了形态学观察以及细胞活力等检测;随后对观察到的现象做进一步的机制探 讨 已有的研究表明,缺糖可引起细胞凋亡,而谷氨酰胺可以抑制细胞的凋亡。 因而预期观察到的现象应该是在相同的缺糖时间点,损伤组细胞活力明显低于保 护组和正常组;细胞凋亡率明显高于保护组和正常组。细胞在多种应激作用下往 往会启动内源性凋亡通路,引发随后的细胞死亡。细胞色素c( Cytochrome c,Cyt C)和其他促凋亡因子从线粒体向胞浆的释放是内源性凋亡通路中关键的控制因 素。Bcl-2家族成员是调节内源性凋亡通路的线粒体上游分子,可以通过控制Cyt C的释放影响凋亡的进程。Bax是Bcl-2蛋白家族中的一个促凋亡蛋白,其表达 增加或构象改变后易位到线粒体,促进了线粒体外膜的通透性转换孔的形成和开 放,从而释放出CytC和凋亡诱导因子,激活内源性细胞凋亡途径。为此进一步 探讨了缺糖诱导细胞凋亡以及谷氨酰胺抑制缺糖诱导细胞凋亡的机制,主要检测 了CytC的释放以及Bax表达和构象改变。已有的研究还表明,多个信号通路 (Ras/ Raf/MEK/ERK通路、PI3KAKT通路等)的活化可以作用于Bc12家族成 员Bax从而调控细胞凋亡,因而可通过特异性的通路抑制剂和WB技术探讨多 个信号通路与缺糖诱导细胞凋亡及谷氨酰胺细胞保护过程中的关系。 技术路线图如下: 图4-1-1细胞损伤及保护相关的技术路线图 据此,设计一个关于细胞损伤与保护研究的具体方案,并绘制其他细胞损伤 和保护的技术路线图。 (复旦大学杨玲)间点首先观察了缺糖对 PC12 细胞的损伤以及谷氨酰胺对细胞的保护作用，主要 进行了形态学观察以及细胞活力等检测；随后对观察到的现象做进一步的机制探 讨。 已有的研究表明，缺糖可引起细胞凋亡，而谷氨酰胺可以抑制细胞的凋亡。 因而预期观察到的现象应该是在相同的缺糖时间点，损伤组细胞活力明显低于保 护组和正常组；细胞凋亡率明显高于保护组和正常组。细胞在多种应激作用下往 往会启动内源性凋亡通路，引发随后的细胞死亡。细胞色素 c（Cytochrome c, Cyt C）和其他促凋亡因子从线粒体向胞浆的释放是内源性凋亡通路中关键的控制因 素。Bcl-2 家族成员是调节内源性凋亡通路的线粒体上游分子，可以通过控制 Cyt C 的释放影响凋亡的进程。Bax 是 Bcl-2 蛋白家族中的一个促凋亡蛋白，其表达 增加或构象改变后易位到线粒体，促进了线粒体外膜的通透性转换孔的形成和开 放，从而释放出 Cyt C 和凋亡诱导因子，激活内源性细胞凋亡途径。为此进一步 探讨了缺糖诱导细胞凋亡以及谷氨酰胺抑制缺糖诱导细胞凋亡的机制，主要检测 了 Cyt C 的释放以及 Bax 表达和构象改变。已有的研究还表明，多个信号通路 （Ras/Raf/MEK/ERK 通路、PI3K/AKT 通路等）的活化可以作用于 Bcl-2 家族成 员 Bax 从而调控细胞凋亡，因而可通过特异性的通路抑制剂和 WB 技术探讨多 个信号通路与缺糖诱导细胞凋亡及谷氨酰胺细胞保护过程中的关系。 技术路线图如下： 图 4-1-1 细胞损伤及保护相关的技术路线图 据此，设计一个关于细胞损伤与保护研究的具体方案，并绘制其他细胞损伤 和保护的技术路线图。 （复旦大学 杨玲）