郭宗儒:基于作用机制研制的雷特格韦 1347 的血浆清除率CLp=0.5 mL min-kg,血浆半衰期 2=60h,对细胞色素P450未见抑制作用 然而用含有50%正常人血清的感染细胞(50% NHS,反映化合物的体内活性)评价化合物8的活性 ICas/umol. L 却很弱,推测是因为有较高的logP值,与血浆蛋白 ompound /umol'L-10% FBS 50% NHS 亲和力高而降低了活性。为此,去除苯环,保留碱性 NCH3 1.04 氮原子。 2.52位含有碱性氮的饱和环的变换去除化合物8 的2位苯环,环合成哌啶,哌啶连接于2、3或4位,发 现2-哌啶基化合物9的活性(Cs0=0.13 umol. L)强 于3-或4-哌啶基化合物,但对感染细胞(10%FBS 4567 IC95=1.46μmolL-)的活性和体内活性(50%NHS IC9s=583μmolL)较低,推测是增加了NH使氢 键增多,不利于过膜和药代。哌啶被N甲基化如化合 synthesis of HIV integrase inhibitors: development of 物10的体外活性、细胞活性和预测的体内活性相近, potent and orally bioavailable N-methyl pyrimidones.J 高于化合物9。NN-二甲基哌嗪化合物11尤其是N ed chem,2007,50:4953-4975) 甲基吗啉化合物12有更高的活性。 32位含有碱性氮的开链 与上述平行研发的另一路径是在2位引入含有 碱性氮原子的侧链,即去除化合物8的2位上的苯 环,合成有代表性的2位开链化合物18~21。18对 体外模型具有中等活性。根据上述的哌啶类抑制剂, 与C2相连的碳原子以多取代为佳,合成的化合物 /umol L 10% FBS 50% NHS 19活性显著提高,进而偕甲基取代化合物(20)抑制 整合酶和阻断感染细胞的活性达到相同的高水平 (Pace P, Di Francesco ME, Gardelli C, et al. Dihy 0.20 droxypyrimidine-4-carboxamides as novel potent and selective hiv inhibitors. J Med Ch 50:2225-2239)。 为了进一步提高9~12体内活性,将N甲基化, 使二羟基嘧啶“固定”为酮式结构,合成的有代表 RCN 性化合物13~17活性强于相应的非N甲基化合物 值得一提的是化合物16,它的酶抑制活性和在 10% FBs 50% NHS 10%FBS存在下的抑制感染细胞的活性低于相应的 化合物12,但对50%NHS存在下的抑制感染细胞的 活性显著增强,尤其是经拆分后的右旋体17,3个活 性指标均优于12、16左旋体和消旋体。17的盐酸盐 CH3 有良好的溶解性(58mgmL)和适宜的分布系数 0.078 (logD=0.47,犬的口服生物利用度F=69%,血浆半 衰期1n=72h,低清除率CLp=22 mL- min.kg 0.088 06 在高剂量下对hERG钾通道和CYP450无抑制作用。 然而化合物17虽然有良好的药效学、药动学和物化 其实,在进行上述优化的同时,还将Nl甲基化 性质,但由于有更优良的候选物,未进入临床研究的因素导入本系列,以提高酮酸形式的比例。所设计 ( Gardelli c, Nizi E, Muraglia E, et al. Discovery and的化合物是固定偕甲基片段,改变胺的结构,而且不郭宗儒: 基于作用机制研制的雷特格韦 · 1347 · 的血浆清除率 CLp = 0.5 mL·min−1 ·kg−1 , 血浆半衰期 t1/2=6.0 h, 对细胞色素 P450 未见抑制作用。 然而用含有 50%正常人血清的感染细胞 (50% NHS, 反映化合物的体内活性) 评价化合物 8 的活性 却很弱, 推测是因为有较高的 logP 值, 与血浆蛋白 亲和力高而降低了活性。为此, 去除苯环, 保留碱性 氮原子。 2.5 2 位含有碱性氮的饱和环的变换 去除化合物 8 的 2 位苯环, 环合成哌啶, 哌啶连接于 2、3 或 4 位, 发 现 2-哌啶基化合物 9 的活性 (IC50=0.13 μmol·L −1 ) 强 于 3-或 4-哌啶基化合物, 但对感染细胞 (10% FBS IC95 = 1.46 μmol·L −1 ) 的活性和体内活性 (50% NHS IC95 = 5.83 μmol·L −1 ) 较低, 推测是增加了 N-H 使氢 键增多, 不利于过膜和药代。哌啶被 N 甲基化如化合 物 10 的体外活性、细胞活性和预测的体内活性相近, 高于化合物 9。N,N-二甲基哌嗪化合物 11, 尤其是 N- 甲基吗啉化合物 12 有更高的活性。 IC95/μmol·L −1 Compound R IC50 /μmol·L −1 10% FBS 50% NHS 9 0.13 1.46 5.83 10 0.20 0.14 0.40 11 0.23 0.12 0.62 12 0.03 0.03 0.23 为了进一步提高 9～12 体内活性, 将 N1 甲基化, 使二羟基嘧啶“固定”为酮式结构, 合成的有代表 性化合物 13～17 活性强于相应的非 N-甲基化合物。 值得一提的是化合物 16, 它的酶抑制活性和在 10% FBS 存在下的抑制感染细胞的活性低于相应的 化合物 12, 但对 50% NHS 存在下的抑制感染细胞的 活性显著增强, 尤其是经拆分后的右旋体 17, 3 个活 性指标均优于 12、16 左旋体和消旋体。17 的盐酸盐 有良好的溶解性 (5.8 mg·mL−1 ) 和适宜的分布系数 (logD = 0.47), 犬的口服生物利用度 F = 69%, 血浆半 衰期 t1/2 = 7.2 h, 低清除率 CLp = 2.2 mL·min−1 ·kg−1 , 在高剂量下对 hERG 钾通道和 CYP450 无抑制作用。 然而化合物 17 虽然有良好的药效学、药动学和物化 性质, 但由于有更优良的候选物, 未进入临床研究 (Gardelli C, Nizi E, Muraglia E, et al. Discovery and IC95/μmol·L −1 Compound R IC50 /μmol·L −1 10% FBS 50% NHS 13 0.44 0.83 1.04 14 0.10 0.25 0.19 15 0.10 0.25 0.19 16 0.06 0.06 0.10 17 0.02 0.04 0.065 synthesis of HIV integrase inhibitors: development of potent and orally bioavailable N-methyl pyrimidones. J Med Chem, 2007, 50: 4953−4975)。 3 2 位含有碱性氮的开链 与上述平行研发的另一路径是在 2 位引入含有 碱性氮原子的侧链, 即去除化合物 8 的 2 位上的苯 环, 合成有代表性的 2 位开链化合物 18～21。18 对 体外模型具有中等活性。根据上述的哌啶类抑制剂, 与 C2 相连的碳原子以多取代为佳, 合成的化合物 19 活性显著提高, 进而偕甲基取代化合物 (20) 抑制 整合酶和阻断感染细胞的活性达到相同的高水平 (Pace P, Di Francesco ME, Gardelli C, et al. Dihy￾droxypyrimidine-4-carboxamides as novel potent and selective HIV integrase inhibitors. J Med Chem, 2007, 50: 2225−2239)。 IC95/μmol·L −1 Compound R IC50 /μmol·L −1 10% FBS 50% NHS 18 0.20 1.00 >1.00 19 0.01 0.12 0.50 20 0.05 0.06 0.078 21 0.088 0.06 1.00 其实, 在进行上述优化的同时, 还将 N1 甲基化 的因素导入本系列, 以提高酮酸形式的比例。所设计 的化合物是固定偕甲基片段, 改变胺的结构, 而且不