4.2离心方法的选用 ◆对于常速离心机和高速离心机,由于所分离的颗粒大小和密度相差较大,只要选择好 离心速度和离心时间,就能达到分离效果 ◆如果希望从样品液中分离出2种以上大小和密度不同的颗粒需要采用差速离心方法。 而对于超速离心,则可以根据需要采用差速离心、密度梯度离心或等密梯度离心等方 法。 4.21差速离心 ◆差速离心是指采用不同的离心速度和离心时间,使不同沉降速度的颗粒分批分离的方 42.2密度梯度离心: 密度梯度离心是样品在密度梯度介质中进行离心,使沉降系数比较接近的物质分离的 种区带分离方法 ◆为了使沉降系数比较接近的颗粒得以分离,必须配制好适宜的密度梯度系统。密度梯 度系统是在溶剂中加入一定的溶质制成的。这种溶质称为梯度介质。 ◆常用的梯度介质有蔗糖、甘油等。使用最多的是蔗糖密度梯度系统,其适用范围是 蔗糖浓度5~60%,密度范围1.02~1.30g/cm2。 ◆密度梯度一般采用密度梯度混合器进行制备。制备得到的密度梯度可以分为线性梯 度、凹形梯度和凸形梯度等(图4-1) 密度梯度混合器由贮液室、混合室、电磁搅拌器和阀门等组成,如图4-2所示。 B A10 4.2 离心方法的选用 ◆对于常速离心机和高速离心机，由于所分离的颗粒大小和密度相差较大，只要选择好 离心速度和离心时间，就能达到分离效果； ◆如果希望从样品液中分离出 2 种以上大小和密度不同的颗粒，需要采用差速离心方法。 ◆而对于超速离心，则可以根据需要采用差速离心、密度梯度离心或等密梯度离心等方 法。 4.2.1 差速离心： ◆差速离心是指采用不同的离心速度和离心时间，使不同沉降速度的颗粒分批分离的方 法。 4.2.2 密度梯度离心： ◆密度梯度离心是样品在密度梯度介质中进行离心，使沉降系数比较接近的物质分离的 一种区带分离方法。 ◆为了使沉降系数比较接近的颗粒得以分离，必须配制好适宜的密度梯度系统。密度梯 度系统是在溶剂中加入一定的溶质制成的。这种溶质称为梯度介质。 ◆常用的梯度介质有蔗糖、甘油等。使用最多的是蔗糖密度梯度系统，其适用范围是： 蔗糖浓度 5～60%，密度范围 1.02～1.30 g/cm2。 ◆密度梯度一般采用密度梯度混合器进行制备。制备得到的密度梯度可以分为线性梯 度、凹形梯度和凸形梯度等(图 4-1)。 ◆密度梯度混合器由贮液室、混合室、电磁搅拌器和阀门等组成，如图 4-2 所示。 B A B A B A