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实验一凝集试验 颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应抗体结合后,在有适量电解质存在下,抗 原颗粒可相互凝集成肉眼可见的凝集块,称为凝集反应(Agglutination reaction)或凝集试验。 参与凝集反应的抗原称为凝集原(Agglutinogen),抗体称为凝集素(Agglutinin)。 细菌或其它凝集原都带有相同的负电荷,在悬液中相互排斥而呈现均匀的分散状态。抗 原与相应抗体相遇后可以发生特异性结合,形成抗原抗体复合物,降低了抗原分子间的静电 挂斥力,此时已有凝集的趋向,在电解质(如生理盐水)参与下,由于离子的作用,中和了 抗原抗体复合物外面的大部分电荷,使之失去了彼此向的静电排斥力,分子间相互吸引,凝 集成大的絮片或颗粒,出现了肉眼可见的凝集反应。根据是否出现凝集反应及其程度,对待 测抗原或待测抗体进行定性、定量测定。 凝集反应包括直接凝集反应和间接凝集反应两大类,本实验主要介绍直接凝集反应。 [目的要求] 1.掌握平板凝集试验和试管凝集试验的操作方法。 2.掌握凝集试验的结果判定及判定标准 3.熟悉平板凝集试验和试管凝集试验所需材料和试剂。 [材料与试剂] 1.玻板,载玻片,试管(1cmx8cm),试管架,刻度吸管,滴管,微量可调加样器, 滴头(tip头),牙签或火柴棒,记号笔。 2.灭茵的生理盐水,灭芮的0.5%石炭酸生理盐水。 3.布氏杆菌病试管凝集抗原,布氏杆菌病平板凝集抗原,布氏杆菌病虎红平板凝集抗 原,布氏杆菌病阳性血清,布氏杆菌病阴性血清,被检血清(牛、羊或猪) 4.鸡白荆平板凝集抗原,鸡白痢阳性血清,鸡白痢阴性血清,被检鸡血清。 [实验内容及操作方法] (一)试管凝集试验 以牛布氏杆菌病试管凝集试验为例。 1.试管准各:每份血清用试管4支,另取3支试管作为对照,作好标记,置试管架上。 如被检血清有多份,对照只需做1份
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