第1期 邓秀新等:柑桔原生质体培养与融合研究 34再生植株中出现叶肉类型植株 目前,尚未见柑桔叶肉原生质体单独培养再生的报道.但是,在一些融合组合中发现了 叶肉类型植株12,28.是因为融合的作用,还是另一方的饲喂作用或者是融合体丢失了另一 方的部分(或全部)染色体后再生,有待进一步研究.粗柠檬、酸橙叶肉原生质体单独培 养,曾观察到1~2次分裂,但后来停止生长 3.5体细胞杂种的农艺性状与育性 3.51生长特性及抗性 所获得的几个体细胞杂种植株,有3个已移入大田,表现出四倍体的一些特点,如叶片 较二倍体厚,刺较长、粗,枝条粗壮,同一组合再生出的体细胞杂种之间,叶片和枝梢生长 习性未发现有明显的变异.采用电导法及膜脂肪酸组分分析法,对3个体细胞杂种的抗寒性 进行测定,结果显示,柑桔体细胞杂种的抗寒性介于双亲之间,如金柑与甜橙的体细胞杂种可 耐-9.5℃,而其亲本分别耐-100℃C和-78℃.1993年11月底武汉地区骤然降温,植株未 完全进入耐寒状态,粗柠檬叶片受冻,785%的叶片脱落,而它与抗寒性较强的甜橙的体细胞 杂种落叶率为489%,同条件下的甜橙落叶率为30.4%.同园内:余彬以及金柑与甜橙的体 细胞杂种无落叶,说明原生质体融合途径在培育抗寒祜类型中具有潜在外值 352体细胞杂种的育性1-3 原生质体融合而来的一年生作物的体细胞杂种均存在不育问题3.迄今,已有几例柑桔 体细胞杂种开花结杲的遐道.墨西哥'来檬与‘伏令夏”甜橙种间体细胞杂种表现出可育 年的测定轰踢,其沌粉育性稳定,达到38%~52%,平均每果有6粒左右的种子,枳与甜 橙的属间体细胞杂种花粉育性达到90%,接近高值亲本枳(91%).体细胞杂种植株花粉粒比 亲本大,体积为双亲花粉体积之和.这类异源四倍体植株,由于染色体的互补作用,使原 来亲本的一些不正常现象消失了,如染色体易位突变体伏令夏’甜橙与染色体倒位突变体墨 西哥’'来檬融合之后,杂种的每果种子数比双亲增多,胚囊/花粉均败育的脐橙与枳橙属间 体细胞杂种,也有类似现象,体细胞杂种克服了脐橙的不育性 4问题与展望 41体细胞杂种的倍性问题及解决方法 采用目前的对称融合技术,获得的绝大多数是一个对称杂种.人们在希望获得2个优良 性状重组的同时,尚不能阻止不良性状的进入.正因为如此,在过去的20年中,体细胞对 称融合技术未能有效地应用于育种实践.目前柑桔栽培的品种以二倍体为主,其次是三倍 体,体细胞融合虽然克服了有性杂交中遇到的珠心胚干扰和性器官败育问题,但是,得到的 是一个四倍体,作为接穗品种应用可能会有局限性,针对这一问题可采取下列措施 41.1作为砧木应用 柑桔同其它果树一样,生产中应用的个体是由地上(接穗)和地下(砧木)两部分构成的一 个复合体.人们往往通过釆用理想的砧木来提高地上部分的抗病虫及抗逆能力,而对砧木 本身的果实品质、产量考虑很少,因此,体细胞杂种作为砧木应用将会有很大的潜力,目前 本项目也正在进行这一方面的工作. Grosser等(199,私人通信)的研究表明,枳与甜橙的 体细胞杂种作为砧木,嫁接优良品种伏令夏'甜橙,第二年平均每株挂果20余个,植株表 201994-2008chinaAcademicJournaleLectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp:/www.cnki.net第 期 邓秀新等 柑桔原生质体培养 与融合研究 再生植株中出现叶 肉类型植株 目前 , 尚未见柑桔 叶肉原生质体单独培养再生的报道 但是 , 在一些融合组合 中发现 了 叶肉类 型植株【, 是 因为融合的作用 , 还是另 一方 的饲喂作用 或 者是 融 合体丢失 了另 一 方 的部 分 或 全部 染 色体后 再 生 , 有 待 进 一 步 研 究 粗 柠檬 、 酸 橙 叶 肉原 生 质 体 单独 培 养 , 曾观 察到 一 次分裂 , 但后来停止 生长 体细胞杂种的农艺性状与育性 生长特性及抗性 所获得 的几个体细胞杂种植株 , 有 个 已 移人 大 田 , 表 现 出四 倍体的一些 特点 , 如 叶片 较 二倍体厚 , 刺较 长 、 粗 , 枝 条粗 壮 同一组 合再生 出的体细胞杂种之 间 , 叶片和枝梢生长 习性 未发现有 明显 的变异 采用 电导法 及膜脂肪酸组分分析法 , 对 个体细胞杂种 的抗 寒性 进行测定 , 结果显示 , 柑桔体细胞杂种的抗寒性介于双亲之间 如金柑与甜橙的体细胞杂种可 耐 一 ℃ , 而其亲本分别耐 一 ℃ 和 一 ℃ 年 朋 底武汉地 区骤然 降温 , 植株 未 完全进入耐寒状态 , 粗柠檬叶片受冻 , 的叶片脱落 , 而它与抗寒性较强的甜橙的体细胞 杂种落叶率为 , 同条件下 的甜橙落 叶率为 同一 园 内 , 金柑 以 及金柑 与甜橙 的体 细胞杂种无落叶 , 说明 原生质体融合途 径在培 育抗寒柑桔类型 中具有潜在 价值 体细胞杂种 的育性 一 川 原生质体融合而来 的一 年生作物 的体细胞杂种均存在不育 问题 迄今 , 已有几例柑桔 体细胞杂种开花结果 的报道 ‘ 墨西哥 ’ 来檬 与 ‘ 伏令夏 ’ 甜橙种间体细 胞 杂种 表 现 出 可育 刃 , 几 年的测定表 明 , 其花粉育性稳定 , 达到 一 , 平均每果有 粒左右 的种子 , 积 与甜 橙 的属 间体细胞杂种花粉育性 达到 , 接近高值亲本积 体细胞杂种植株花粉粒 比 亲本大 , 体积 为双亲花粉体积之 和艺 这类异源四倍体植株 , 由于染色体的互补作用 , 使原 来亲本 的一些不正 常现象消失 了 , 如染 色体易位突变体 ‘ 伏令夏 ’甜橙与染色体倒位突变体 ‘ 墨 西哥 ’ 来檬融合之后 , 杂种 的每果种子数 比双亲增 多 , 胚囊 花粉 均 败 育 的脐橙 与积橙 属 间 体细胞杂种 , 也有类似现象 , 体细胞杂种克服 了脐橙 的不 育性 ‘】 问题与展望 体细胞杂种的倍性问题及解决方法 采 用 目前 的对称融 合技术 , 获得 的绝大多数是一个对称杂种 人们在希望获得 个优 良 性状重组 的同时 , 尚不 能阻止不 良性状 的进入 正 因为如此 , 在 过 去 的 年 中 , 体细 胞对 称融合技术未能有效地 应用于育种 实践 目前柑桔栽 培 的 品种 以二倍 体 为 主 , 其次是 三倍 体 , 体细胞融合虽然克服 了有性杂交 中遇到 的珠心胚干扰和性器官败育问题 , 但是 , 得到的 是一 个 四倍体 , 作为接穗品种应用可能会有局 限性 , 针对这一 问题 可采取下列措施 作为砧木应用 柑桔 同其它果树一样 , 生产中应用 的个体是 由地上 接穗 和地下 砧木 两部分构成 的一 个复合体 人们往往通过采用理 想 的砧 木 来提 高地 上部 分 的抗 病 虫及 抗 逆 能 力 , 而 对砧木 本身的果 实 品质 、 产量 考虑很少 因此 , 体细胞杂种作为砧木应用将会有很大的潜力 , 目前 , 本项 目也正 在进行这一方面的工作 等 , 私人 通 信 的研究 表 明 , 积 与甜橙的 体细胞 杂种作为砧木 , 嫁接优 良品种 ‘ 伏令夏 ’ 甜橙 , 第二年平均每 株挂 果 余个 , 植株 表