质粒DNA的小量制备 ①将含有质粒DNA的大肠杆菌接种到LB培养基中(含有相应 抗生素),在37℃下震荡培养过夜,这样质粒DNA便随着 细菌的繁殖而得到了大量的扩增。当细菌培养物生长到对 数晚期时,我们就可获得很高产量的质粒DNA。 ②通过离心收集细菌,用碱性溶液处理使得细菌细胞裂解 释放出其中的质粒DNA分子。在碱性条件下,宿主的线状 染色体DNA发生变性,但是闭环质粒DNA双链由于处于拓 扑缠绕状态而不能彼此分开,所以当条件恢复正常时,质 粒DNA链迅速得到准确复位成为超螺旋分子 ③通过离心去掉细胞碎片、染色体DNA和其它杂质,并将水 相的质粒DNA分子用乙醇沉淀出来,最后溶于TE缓冲液或 纯水中备用。质粒DNA的小量制备 ①将含有质粒DNA的大肠杆菌接种到LB培养基中（含有相应 抗生素），在37℃下震荡培养过夜，这样质粒DNA便随着 细菌的繁殖而得到了大量的扩增。当细菌培养物生长到对 数晚期时，我们就可获得很高产量的质粒DNA。 ②通过离心收集细菌，用碱性溶液处理使得细菌细胞裂解， 释放出其中的质粒DNA分子。在碱性条件下，宿主的线状 染色体DNA发生变性，但是闭环质粒DNA双链由于处于拓 扑缠绕状态而不能彼此分开，所以当条件恢复正常时，质 粒DNA链迅速得到准确复位成为超螺旋分子。 ③通过离心去掉细胞碎片、染色体DNA和其它杂质，并将水 相的质粒DNA分子用乙醇沉淀出来，最后溶于TE缓冲液或 纯水中备用