单克隆抗体技术 12307130450梅蓝尹 抗原 应用原理:动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞 系,含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。 骨髓瘤细胞 当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分 别激活各个具有不同基因的B细胞。B淋巴细胞能 ◎)杂交瘤细胞 够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂;而瘤细 ↓细胞培养 L,,」 所需要的细 胞虽然可以在体外进行无限传代,但不能产生抗体。 继续培养 将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞既能产生 体内培养 抗体,又能无限增殖,这样就能迅速得到一个可以 体外培养 大量制造专一抗体的细胞群 应用实例: 从培养液中 从腹水中提取 1、检验医学诊断试剂 单克隆抗体 目前,应用单克隆抗体制作的商品化试剂盒广 泛应用于: ①病原微生物抗原、抗体的检测 ②肿瘤抗原的检测 ③免疫细胞及其亚群的的检测 ④激素测定 ⑤细胞因子的测定 单克隆抗体对抗原的识别,与多克隆抗体有很大的不同。不同试剂盒因使用的单克 隆抗体不同,识别抗原的位点不同,导致检测结果有一定差异。因此,标准化问题 还需要进一步研究 2、蛋白质的提纯 单克隆抗体是亲和层析中重要的 配体。将单克隆抗体吸附在一个惰 性的固相基质上,并制备成层析柱 ◆▲ 当样品流经层析柱时,待分离的抗 原可与固相的单克隆抗体发生特 接器 异性结合,其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后,改变洗脱液的离子强度 或皿,欲分离的抗原与抗体解离,收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原单克隆抗体技术 12307130450 梅蓝尹 应用原理: 动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞 系，含遗传基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。 当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分 别激活各个具有不同基因的 B 细胞。B 淋巴细胞能 够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细 胞虽然可以在体外进行无限传代，但不能产生抗体。 将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞既能产生 抗体，又能无限增殖，这样就能迅速得到一个可以 大量制造专一抗体的细胞群。 应用实例: 1、检验医学诊断试剂 目前，应用单克隆抗体制作的商品化试剂盒广 泛应用于： ① 病原微生物抗原、抗体的检测； ② 肿瘤抗原的检测； ③ 免疫细胞及其亚群的的检测； ④ 激素测定； ⑤细胞因子的测定。 单克隆抗体对抗原的识别，与多克隆抗体有很大的不同。不同试剂盒因使用的单克 隆抗体不同，识别抗原的位点不同，导致检测结果有一定差异。因此，标准化问题 还需要进一步研究。 2、蛋白质的提纯 单克隆抗体是亲和层析中重要的 配体。将单克隆抗体吸附在一个惰 性的固相基质上，并制备成层析柱。 当样品流经层析柱时，待分离的抗 原可与固相的单克隆抗体发生特 异性结合，其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后，改变洗脱液的离子强度 或 pH，欲分离的抗原与抗体解离，收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原