一、实验目的要求 (一)了解液相色谱分离系统的结构和原理: (二)熟悉高效液相色谱仪的使用方法: (三)掌握高效液相色谱测定咖啡因的方法。 二、实验内容 (一)咖啡因标准工作溶液及样品溶液的配制: (二)开机:依次打开高压泵、检测器、工作站。调整色谱条件。待基线稳定后, 开始进样: (三)标准工作曲线的绘制:待基线稳定后,取各浓度标准溶液20L,按浓度从 低到高依次进样,记录峰面积和保留时间的数据: (四)样品测定:取待测样品20叫进样,记录峰面积和保留时间的数据,重复两 次,取平均值,要求两次峰面积数据基本一致: (五)根据实验数据,绘制咖啡因浓度和峰面积的标准工作曲线: (六)根据保留时间,从样品色谱图上找出咖啡因的峰。根据样品色谱图咖啡因 的峰面积及标准工作曲线,计算样品中咖啡因的含量。 课程考核方式 考核方式和成绩构成:采用闭卷考试,平时成绩占30%,考试成绩占70% 理论课闭卷考试双向细目表 序号 讲课内容 试卷分值 1 第一章绪论 约3 2 第二章光谱分析法导论 3 2 第三章紫外可见分光光度法 6 4 第四章红外光谱法 8 5 第五章荧光光谱法 6 6 第六章原子吸收光谱法 6 7 第七章核磁共振波谱法 8 8 第八章质谱分析法 8 16