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细胞生物学教 http://www.cella.cn (六)、偏光显微镜 偏光显微镜(polarizing microscope)用于检测具有双折射性的物质,如纤维丝 纺锤体、胶原、染色体等等。和普通显微镜不同的是:其光源前有偏振片(起偏器) 使进入显微镜的光线为偏振光,镜筒中有检偏器(一个偏振方向与起偏器垂直的的 起偏器),这种显微镜的载物台是可以旋转的,当载物台上放入单折射的物质时,无 论如何旋转载物台,由于两个偏振片是垂直的,显微镜里看不到光线,而放入双折 射性物质时,由于光线通过这类物质时发生偏转,因此旋转载物台便能检测到这种 物体。 (七)、微分干涉差显微镜 1952年,Nomarski在相差显微镜原理的基础上发明了微分干涉差显微镜 arki contrast r contrast pe 示结构的 与相差显微镜相比,其标本可略厚 点,折射率差别更大, 故影像的立体感更强 DIC显微镜的物理原理完全不同于相差显微镜,技术设计要复杂得多。DC利 用的是偏振光,有四个特殊的光学组件:偏振器(polarizer)、DIC棱镜、DIC滑行 器和检偏器(analyzer)。偏振器直接装在聚光系统的前面,使光线发生线性偏振。 在聚光器中则安装了石英Wollaston棱镜,即D1C棱镜,此棱镜可将一束光分解成 偏振方向不同的两束光(x和y),二者成一小夹角。聚光器将两束光调整成与显微 镜光轴平行的方向。最初两束光相位一致,在穿过标本相邻的区域后, 由王标水的 度和折射率 ”两市发生了业 竞的后焦面处安装了第二个 Nol aston DIC 滑行器 它把两束 束 这时两束光的价 振面 (x和y)仍然存在。最后光束穿过第二个偏振装置,即检偏器。在光束形成目镜 DC影像之前,检偏器与偏光器的方向成直角。检偏器将两束垂直的光波组合成具 有相同偏振面的两束光,从而使二者发生干涉。×和y波的光程差决定着透光的多 少。光程差值为0时,没有光穿过检偏器;光程差值等于波长一半时,穿过的光达 到最大值。于是在灰色的背景上,标本结构呈现出亮暗差。为了使影像的反差达到 最佳状态,可酒过调节DC滑行婴的纵行激调来改变业程常.业程差可可改恋影像的 亮度。 调节DC滑行器可使标本的细微结构现出正或负的投影形象,通常是一侧 闲)潮盐明可生面子海杀‘绍封不形三华丫阳4型面冠·知一各望鉴细胞生物学教程 http://www.cella.cn 17 (六)、偏光显微镜 偏光显微镜(polarizing microscope)用于检测具有双折射性的物质,如纤维丝、 纺锤体、胶原、染色体等等。和普通显微镜不同的是:其光源前有偏振片(起偏器), 使进入显微镜的光线为偏振光,镜筒中有检偏器(一个偏振方向与起偏器垂直的的 起偏器),这种显微镜的载物台是可以旋转的,当载物台上放入单折射的物质时,无 论如何旋转载物台,由于两个偏振片是垂直的,显微镜里看不到光线,而放入双折 射性物质时,由于光线通过这类物质时发生偏转,因此旋转载物台便能检测到这种 物体。 (七)、微分干涉差显微镜 1952 年,Nomarski 在相差显微镜原理的基础上发明了微分干涉差显微镜 (differential interference contrast microscope)。DIC 显微镜又称 Nomarski 相差 显微镜(Nomarki contrast microscope),其优点是能显示结构的三维立体投影影像。 与相差显微镜相比,其标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。 DIC 显微镜的物理原理完全不同于相差显微镜,技术设计要复杂得多。DIC 利 用的是偏振光,有四个特殊的光学组件:偏振器(polarizer)、DIC 棱镜、DIC 滑行 器和检偏器(analyzer)。偏振器直接装在聚光系统的前面,使光线发生线性偏振。 在聚光器中则安装了石英 Wollaston 棱镜,即 DIC 棱镜,此棱镜可将一束光分解成 偏振方向不同的两束光(x 和 y),二者成一小夹角。聚光器将两束光调整成与显微 镜光轴平行的方向。最初两束光相位一致,在穿过标本相邻的区域后,由于标本的 厚度和折射率不同,引起了两束光发生了光程差。在物镜的后焦面处安装了第二个 Wollaston 棱镜,即 DIC 滑行器,它把两束光波合并成一束。这时两束光的偏振面 (x 和 y)仍然存在。最后光束穿过第二个偏振装置,即检偏器。在光束形成目镜 DIC 影像之前,检偏器与偏光器的方向成直角。检偏器将两束垂直的光波组合成具 有相同偏振面的两束光,从而使二者发生干涉。x 和 y 波的光程差决定着透光的多 少。光程差值为 0 时,没有光穿过检偏器;光程差值等于波长一半时,穿过的光达 到最大值。于是在灰色的背景上,标本结构呈现出亮暗差。为了使影像的反差达到 最佳状态,可通过调节 DIC 滑行器的纵行微调来改变光程差,光程差可改变影像的 亮度。调节 DIC 滑行器可使标本的细微结构呈现出正或负的投影形象,通常是一侧 亮,而另一侧暗,这便造成了标本的人为三维立体感,类似大理石上的浮雕(图 2-10)
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