重要应用 Alkali digestion② oligo(T)primer Reverse of mRNA template CDNA 3H0-TTTT'5 transcriptase dNTPs 3/H0 TTTnT 5' Attach oligo(dG) ③ to 3'end of cDNA 5 AAAA-OH 3 ① AAAnA-OH 3 mRNA Poly(A)tail mRNA Oligo(dc)primer 3'HO-GGpGG- Reverse transcriptase dNTPs 3'HO-GGnGG TTTnT 5' 5'CCpCC AAA A-OH 3' ④ Double-stranded CDNA 利用mRNA经逆转录生成cDNA时，在逆转录生成cDNA第一 链后，提高pH,RNA-DNA杂交双链中的RNA将被降解，而 cDNA第一链不被降解，可继续做模板合成其互补链，得到双 链CDNA. 利用mRNA经逆转录生成cDNA时，在逆转录生成cDNA第一 链后，提高pH, RNA-DNA杂交双链中的RNA将被降解，而 cDNA第一链不被降解，可继续做模板合成其互补链，得到双 链cDNA。 重要应用