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(四)显微镜的物镜 显微镜的成象质量在很大程度上取决于物镜的质量,因此物镜是显微镜最重要的部 件。近年来由于采用了计算机技术 ,物镜的设计和制造都有了很大改进 (山数值或径(NA) 物镜的数值孔径表示物镜收集光线的能力。物镜对试样上各点的反射光收集得域多 成象质量就越好。数值孔径常以NA来表示,并用下列公式进行计算: NA =nsind) (15 式中:n为物镜与试样之间介质的折射率:为物镜孔径角的一半(图1-6)。由式(1一5) 可知,中角越大,物镜前透镜收集光线的能力就越大。角的大小取决于前透镜的尺寸和物 镜的工作距离(即显微镜成象清楚时,从试样表面到前透镜之间的距离)。对于干系物镜(即物 镜与试样之间的介质为空气),由于=l,因而物镜的数值孔径不能大于1,一般只能到0.9 左右。对于油浸物镜,由于物镜与试样之间放了折射率较大的介质,因而进入物镜的光线增 加,如图1-7所示,可以看出,孔径角为2的油浸物镜收集光线的能力相当于孔径角为2, 的干系物镜。 当介质为n 1,515的松柏油时,数值孔径值最大可达14左右 油浸物镜在物 镜镜体上刻有H五、O1或01,同时有环绕镜体的黑圈标志。物镜的数值孔径一般都标在物 镜的镜体上。 2)分率 显微镜的分辨率用它能清晰地分辨试样上两点间的最小距离d表示 分辨率决定了显 微镜分辨试样上细节的程度。前面已经提到,显微镜的物镜是使物体放大成一实象,目镜的 作用是使这个实象再次放大,这就是说,目镜只能放大物镜己分辨的细节,物镜未能分辨的 细节,决不会通过目镜放大而变得可分辨。因此显微镜的分辨率主要取决于物镜的分辨率。 物镜分辨率的表达式如下: d-2N.A. (1-6) 式中:2为入射光的波长:NA为物镜的数值孔径。由式(1-6)可知,对于一定波长的入射 光,物镜的分辨率完全取决于物镜的数值孔径:数值孔径越大,分辨率就越高。 空气 b ☑ 图1-6干系物镜的孔径角和数值孔径 图1-7油浸物镜的孔径角和数值孔径 N.A.=sin=4 N.A.=sin=sinΦ 为了充分利用物镜的分辨率,使操作者看清己被物镜分辨出的组织细节,显微镜必须有 适当的放大率。人眼睛能看清的组织细节对眼睛的视角应大于眼睛的极限分辨角。当照明条 件良好时,这一极限分辨角约为1。为了使眼晴能够不太费力地分辨,视角应不小于4 (四) 显微镜的物镜 显微镜的成象质量在很大程度上取决于物镜的质量,因此物镜是显微镜最重要的部 件。近年来由于采用了计算机技术,物镜的设计和制造都有了很大改进。 (1) 数值孔径(N.A.) 物镜的数值孔径表示物镜收集光线的能力。物镜对试样上各点的反射光收集得越多, 成象质量就越好。数值孔径常以 N.A.来表示,并用下列公式进行计算: N.A.=nsinΦ (1-5) 式中:n 为物镜与试样之间介质的折射率;Φ 为物镜孔径角的一半(图 1-6)。由式(1—5) 可知,Φ 角越大,物镜前透镜收集光线的能力就越大。Φ 角的大小取决于前透镜的尺寸和物 镜的工作距离(即显微镜成象清楚时,从试样表面到前透镜之间的距离)。对于干系物镜(即物 镜与试样之间的介质为空气),由于 n=1,因而物镜的数值孔径不能大于 1,一般只能到 0.9 左右。对于油浸物镜,由于物镜与试样之间放了折射率较大的介质,因而进入物镜的光线增 加,如图 1-7 所示,可以看出,孔径角为 2Φ 的油浸物镜收集光线的能力相当于孔径角为 2Φ1 的干系物镜。当介质为 n=1.515 的松柏油时,数值孔径值最大可达 1.4 左右。油浸物镜在物 镜镜体上刻有 Hi、Oil 或 Ö1,同时有环绕镜体的黑圈标志。物镜的数值孔径一般都标在物 镜的镜体上。 (2) 分辨率 显微镜的分辨率用它能清晰地分辨试样上两点间的最小距离 d 表示。分辨率决定了显 微镜分辨试样上细节的程度。前面已经提到,显微镜的物镜是使物体放大成一实象,目镜的 作用是使这个实象再次放大,这就是说,目镜只能放大物镜已分辨的细节,物镜未能分辨的 细节,决不会通过目镜放大而变得可分辨。因此显微镜的分辨率主要取决于物镜的分辨率。 物镜分辨率的表达式如下: 2 . d N A    (1-6) 式中:λ 为入射光的波长;N.A.为物镜的数值孔径。由式(1-6)可知,对于一定波长的入射 光,物镜的分辨率完全取决于物镜的数值孔径;数值孔径越大,分辨率就越高。 图 1-6 干系物镜的孔径角和数值孔径 图 1-7 油浸物镜的孔径角和数值孔径 . 1 a N A sin b     N A n . sin sin      1  为了充分利用物镜的分辨率,使操作者看清已被物镜分辨出的组织细节,显微镜必须有 适当的放大率。人眼睛能看清的组织细节对眼睛的视角应大于眼睛的极限分辨角。当照明条 件良好时,这一极限分辨角约为 1′。为了使眼睛能够不太费力地分辨,视角应不小于
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