一、实验目的 熟悉水产细菌性病原的分离、培养、纯化与鉴定的基本方法，了解所分离细菌性病原的形态 特征及培养特点，了解细菌性灭活疫苗制备的基本过程。 二、实验材料 患白内障病虎纹蛙（或其他患细菌性疾病的水产动物）、健康虎纹蛙、脑膜炎败血黄杆菌（虎 纹蛙白内障病的病原) 三、实验药品、用具 2216E琼脂平板、2216E琼脂斜面、福尔马林、无南蒸馏水、生理盐水、磷酸缓冲液、接 种环、解剂刀、剪刀、镊子、滴管、纱布、白瓷盘、酒精棉球、灭菌试管、96孔板、注射 器、酒精灯、离心机（包括离心管）、水族箱、记号笔、 四、实验操作程序 (一)病原菌的分离与鉴定 1.培养基的制备 (1)普通肉汤培养基： 按以下剂量称取各种试剂（先称取盐类再称蛋白陈及牛肉膏），置于铝锅或塘瓷缸中。 牛肉音5g磷酸氢二钾1g 蛋白陈10g蒸馏水1000ml 氯化钠5g州7.4~7.6 初配好的培养基呈酸性故要用NaO州调整。将pH测定后的肉汤培养基用滤纸过滤，将过滤 好的肉汤分装试管、盐水瓶、三角烧瓶等容器，待灭菌。 (2)普通营养琼脂培养基一、实验目的 熟悉水产细菌性病原的分离、培养、纯化与鉴定的基本方法，了解所分离细菌性病原的形态 特征及培养特点，了解细菌性灭活疫苗制备的基本过程。 二、实验材料 患白内障病虎纹蛙（或其他患细菌性疾病的水产动物）、健康虎纹蛙、脑膜炎败血黄杆菌（虎 纹蛙白内障病的病原） 三、实验药品、用具 2216E 琼脂平板、 2216E 琼脂斜面、福尔马林、无菌蒸馏水、生理盐水、磷酸缓冲液、接 种环、解剖刀、剪刀、镊子、滴管、纱布、白瓷盘、酒精棉球、灭菌试管、 96 孔板、注射 器、酒精灯、离心机（包括离心管）、水族箱、记号笔、 四、实验操作程序 （一）病原菌的分离与鉴定 1 ．培养基的制备 （ 1 ）普通肉汤培养基： 按以下剂量称取各种试剂（先称取盐类再称蛋白胨及牛肉膏），置于铝锅或搪瓷缸中。 牛肉膏 5g 磷酸氢二钾 1g 蛋白胨 10g 蒸馏水 1000ml 氯化钠 5g pH 7 . 4 ～ 7 . 6 初配好的培养基呈酸性故要用 NaOH 调整。将 pH 测定后的肉汤培养基用滤纸过滤，将过滤 好的肉汤分装试管、盐水瓶、三角烧瓶等容器，待灭菌。 （ 2 ）普通营养琼脂培养基