(四)培养基 1.培养基成份培养基由无机营养成分、有机营养成分、碳原、生长调节剂、凝固剂 等基本成分组成。无机营养成分包括大量元素和微量元素。有机营养成分包括维生素、氨基 酸、肌醇、其它有机添加物(CM、CH、LH、YE等)。生长调节剂包括生长素类(IAA、BA、 NAA、2.4-D)、细胞分裂素类(KT、6-BA、2-ip、ZT、TDZ)、赤霉素。碳源主要为蔗糖和 葡萄糖。 2.培养基的种类根据培养基盐浓度划分为高盐培养基、高硝酸盐培养基、中盐培养 基、低盐培养基。不同种类培养基的典型代表及使用对象。 3.培养基的配制母液的概念。母液的配制方法及标签格式。母液的保存方法与使用 要求。培养基的配制程序与方法。培养基pH值的调整方法与要求。培养容器的封口方法与 要求。培养基的灭菌方法与要求。影响培养基凝固的因素：琼脂用量、pH值、灭菌温度与 时间。 本章重点：培养基的基本成份。生长调节剂的种类、作用及使用方法。母液的配制方法 和保存条件。培养基配制的基本程序和方法。 本章难点：离体培养中生长调节剂的生理功能。培养基母液扩大倍数、定容体积与抽取 量之间的关系。影响培养基凝固的因素。 教学要求：通过对培养基基本成分的学习，能全面理解培养基是组织培养的物质基础， 它既具有营养功能，又具有生理调节功能。重点掌握维生素、生长调节剂的生理功能和使用 方法。通过理论学习和实验操作，熟练掌握培养基的配制方法和程序，能够根据培养基的分 装量确定适宜的灭菌时间，能够正确分析导致培养基过硬或过软原因，并提出相应的解决措 施。了解目前主要使用的培养基类型。 习题与作业： 1.简述培养基的基本成分和使用浓度范围？ 2.用图标形式表述MS培养基母液的配制方法。 3.影响培养基凝固的因素有哪些？ 4,组织培养中生长调节物质如何配制与保存？ 5.VB3和VB5的商品名日前有混淆现象，通过查阅资料进行纠正。 6.生物素和叶酸如何溶解配制水溶液？ (五)组织培养的基本程序 1.初代培养外植体的选择与确定：包括品种选择、部位确定、取材季节、器宫的生 理状态和发育年龄。外植体的表面消毒：常用消毒剂的种类、特点、使用浓度和消毒时间， 不同外植体的消毒方法。外植体污染物的识别和特点：细菌性污染（包括芽孢杆菌）和真菌 性污染，污染的防治和污染物的处理措施。外植体褐化的概念、产生的原因及防治措施