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实验十四 核酸的显示方法——Feulgen 反应 仪器设备:恒温水浴锅 器具:盖玻片、载玻片、培养皿、滤纸、镊子、吸水纸、剪刀、解剖盘、解剖针、棕色滴瓶 染色缸 材料:蛙血 试剂及其配置:甲醇原液、Ringer 氏生理盐水 1N 盐酸 亚硫酸水 1%亮绿 甘油/PBS 封片剂 Schiff”s 试剂 肝素抗凝剂 (每毫升生理盐水含 1mg 肝素钠) a:1NHCl: 浓盐酸 8.5ml 定容至 100 毫升 b:亚硫酸水:10%偏重亚硫酸钠 5 毫升 1NHCl 5 毫升 蒸馏水 90毫升 c:Schiff”s 试剂: 称取 0.5g 碱性品红(basic fuchsin),加入到 100ml 煮沸的 蒸馏水中,时时搅拌,继续煮 5 分钟,使之充分溶解,但勿 使沸腾。然后冷却至 50℃时用滤纸过滤。往虑液中加入 10ml 1mol/L 盐酸,冷却至 25℃时,加入 1g 偏重亚硫酸钠 (NaHSO3),摇荡后塞紧玻璃塞在室温避光处静置 12-24 小 时,使其颜色退至淡黄色。然后加入 1g 活性炭,用力摇荡 1 分钟,封严瓶塞,储存于 4℃冰箱备用。 使用前升至室温。注意随时盖紧瓶口,不要过长时间暴 露在空气中,并用黑纸或暗盒避光,以避免氧化变成红色。 如变成红色即失去染色能力。 d:1%亮绿水溶液 e:甘油/PBS 封片剂 ( 0.01M PBS:甘油=1:9 (V/V))实验十四 核酸的显示方法——Feulgen 反应 仪器设备:恒温水浴锅 器具:盖玻片、载玻片、培养皿、滤纸、镊子、吸水纸、剪刀、解剖盘、解剖针、棕色滴瓶 染色缸 材料:蛙血 试剂及其配置:甲醇原液、Ringer 氏生理盐水 1N 盐酸 亚硫酸水 1%亮绿 甘油/PBS 封片剂 Schiff”s 试剂 肝素抗凝剂 (每毫升生理盐水含 1mg 肝素钠) a:1NHCl: 浓盐酸 8.5ml 定容至 100 毫升 b:亚硫酸水:10%偏重亚硫酸钠 5 毫升 1NHCl 5 毫升 蒸馏水 90毫升 c:Schiff”s 试剂: 称取 0.5g 碱性品红(basic fuchsin),加入到 100ml 煮沸的 蒸馏水中,时时搅拌,继续煮 5 分钟,使之充分溶解,但勿 使沸腾。然后冷却至 50℃时用滤纸过滤。往虑液中加入 10ml 1mol/L 盐酸,冷却至 25℃时,加入 1g 偏重亚硫酸钠 (NaHSO3),摇荡后塞紧玻璃塞在室温避光处静置 12-24 小 时,使其颜色退至淡黄色。然后加入 1g 活性炭,用力摇荡 1 分钟,封严瓶塞,储存于 4℃冰箱备用。 使用前升至室温。注意随时盖紧瓶口,不要过长时间暴 露在空气中,并用黑纸或暗盒避光,以避免氧化变成红色。 如变成红色即失去染色能力。 d:1%亮绿水溶液 e:甘油/PBS 封片剂 ( 0.01M PBS:甘油=1:9 (V/V))
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