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(1)过夜培养含有质粒的细菌 (2)加入溶液I、IⅡ、II,使细菌破裂,质粒和染色体DNA变性,质粒DNA选择性复性 (3)离心,质粒DNA吸附在吸附柱上,加入Wash buffer冲洗 (4)洗脱缓冲液洗脱DNA。 4.教学方法: (1)PPT讲解与实地操作: 5.教学评价 (1)完成实验报告 (2)核酸蛋白测定仪测质粒DNAOD26/OD280,查看其浓度和纯度。 实验二琼脂糖凝胶电泳 教学目标 本次实验制备1%琼脂糖凝胶,并进行琼脂糖凝胶电泳,掌握琼脂糖凝胶电泳的制备,熟悉琼脂糖凝胶电泳参数设 置。 2.教学重难点 (1)教学重点:琼脂糖凝胶制备:电泳参数设置 (2)教学难点:琼脂糖凝胶制备,防止液体溢出烫伤。 3.教学内容 (1)琼脂糖加热融化后,加入GelRed,倒平板: (2)样品与6*loading buffer混合后,加入样品孔: (3)设置参数,电泳(1)过夜培养含有质粒的细菌 (2)加入溶液 I、II、III,使细菌破裂,质粒和染色体 DNA 变性,质粒 DNA 选择性复性 (3)离心,质粒 DNA 吸附在吸附柱上,加入 Wash buffer 冲洗 (4)洗脱缓冲液洗脱 DNA。 4.教学方法: (1)PPT 讲解与实地操作; 5.教学评价 (1)完成实验报告 (2)核酸蛋白测定仪测质粒 DNAOD260/OD280,查看其浓度和纯度。 实验二 琼脂糖凝胶电泳 1. 教学目标 本次实验制备 1%琼脂糖凝胶,并进行琼脂糖凝胶电泳,掌握琼脂糖凝胶电泳的制备,熟悉琼脂糖凝胶电泳参数设 置。 2.教学重难点 (1)教学重点:琼脂糖凝胶制备;电泳参数设置 (2)教学难点:琼脂糖凝胶制备,防止液体溢出烫伤。 3.教学内容 (1)琼脂糖加热融化后,加入 GelRed,倒平板; (2)样品与 6*loading buffer 混合后,加入样品孔; (3)设置参数,电泳;
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