TEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶等。 ◇共价键结合法:通过共价键将酶与载体结合的固定化方法称为共价键结合法。 共价键结合法所采用的载体主要有纤维素、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶、甲壳质、氨基 酸共聚物、甲基丙稀醇共聚物等 酶分子中可以形成共价键的基团主要有∶氨基、羧基、巯基、羟基、酚基和咪唑基等。 ◇要使载体与酶形成共价键,必须首先使载体活化,即借助于某种方法,在载体上引进 活泼基团。然后此活泼基团再与酶分子上的某一基团反应,形成共价键。 ◇使载体活化的方法很多。主要的有重氮法、迭氮法、溴化氰法和烷化法等。 (4)交联法 ◆借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用,制成网状结构的固定化酶的方法称为交联 法。交联法也可用于含酶菌体或菌体碎片的固定化。 ◆常用的双功能试剂有戊二醛、己二胺、顺丁烯二酸酐、双偶氮苯等。其中应用最广泛的 是戊二醛。 (5)热处理法 ◆将含酶细胞在一定温度下加热处理一段时间,使酶固定在菌体内,而制备得到固定化菌体 ◆热处理法只适用于那些热稳定性较好的酶的固定化,在加热处理时,要严格控制好加热温 度和时间,以免引起酶的变性失活 12固定化酶的特性 (1)稳定性固定化酶的稳定性一般比游窝酶的稳定性好 (2)最适温度:固定化酶的最适作用温度一般与游离酶差不多,活化能也变化不大。 (3)最适pH值:酶经过固定化后,其作用的最适pH值往往会发生一些变化 ◆影响固定化酶最适pH值的因素主要有两个,一个是载体的带电性质,另一个是酶催3 TEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶等。 ◇共价键结合法：通过共价键将酶与载体结合的固定化方法称为共价键结合法。 共价键结合法所采用的载体主要有：纤维素、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶、甲壳质、氨基 酸共聚物、甲基丙稀醇共聚物等。 酶分子中可以形成共价键的基团主要有：氨基、羧基、巯基、羟基、酚基和咪唑基等。 ◇要使载体与酶形成共价键，必须首先使载体活化，即借助于某种方法，在载体上引进 一活泼基团。然后此活泼基团再与酶分子上的某一基团反应，形成共价键。 ◇使载体活化的方法很多。主要的有重氮法、迭氮法、溴化氰法和烷化法等。 (4)交联法 ◆借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用，制成网状结构的固定化酶的方法称为交联 法。交联法也可用于含酶菌体或菌体碎片的固定化。 ◆常用的双功能试剂有戊二醛、己二胺、顺丁烯二酸酐、双偶氮苯等。其中应用最广泛的 是戊二醛。 (5)热处理法 ◆将含酶细胞在一定温度下加热处理一段时间，使酶固定在菌体内，而制备得到固定化菌体。 ◆热处理法只适用于那些热稳定性较好的酶的固定化，在加热处理时，要严格控制好加热温 度和时间，以免引起酶的变性失活。 1.2 固定化酶的特性 (1)稳定性:固定化酶的稳定性一般比游离酶的稳定性好。 (2)最适温度: 固定化酶的最适作用温度一般与游离酶差不多，活化能也变化不大。 (3)最适 pH 值: 酶经过固定化后，其作用的最适 pH 值往往会发生一些变化。 ◆影响固定化酶最适 pH 值的因素主要有两个，一个是载体的带电性质，另一个是酶催