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实验一、二试剂配方 1. 5N NaoH 20g溶于H2O至终体积100ml,高压灭菌 2. 0.1 M Ca Clz 1.lg溶于HO至终体积100ml,高压灭菌或无菌抽滤 3. 60 mg/ml Amp 0.6g溶于ddH1O至终体积10ml,无菌抽滤 4.LB培养基 Bacto-tryptone10g)溶于950mHO,5 NNaoho约02ml) Bacto-yeast extract 5g或一小块固体NaOH调节调pH至7.0, Nacl 10g 加H2O至终体积1000ml,高压灭菌 5.含琼脂的LB培养基 15g加入LB中,高压灭菌,轻轻旋动使琼脂溶解,冷 至50度左右浇板或加入抗生素后浇板。 6.TE(pH8.0) I MTris(pH8.0) 10ml1溶于H2O至终体积1000ml 0.5 MEDTA(pH8.0)2mlJ高压灭菌 7. IM Tris(pH8.0) 121 Ig Tris溶于800mlH2O,浓盐酸42ml调pH8.0,加 入H2O至终体积1000ml,高压灭菌实验一、二试剂配方 1. 5 N NaOH 20g 溶于 H2O 至终体积 100ml,高压灭菌 2. 0.1 M CaCl2 1.1g 溶于 H2O 至终体积 100ml,高压灭菌或无菌抽滤 3. 60 mg/ml Amp 0.6 g 溶于 ddH2O 至终体积 10ml,无菌抽滤 4. LB 培养基 Bacto-tryptone 10g 溶于 950ml H2O,5N NaOH(约 0.2ml) Bacto-yeast extract 5g 或一小块固体 NaOH 调节调 pH 至 7.0, NaCl 10g 加 H2O 至终体积 1000 ml,高压灭菌 5. 含琼脂的 LB 培养基 15g 加入 1L LB 中,高压灭菌,轻轻旋动使琼脂溶解,冷 至 50 度左右浇板或加入抗生素后浇板。 6. TE(pH8.0) 1M Tris(pH8.0) 10 ml 溶于 H2O 至终体积 1000 ml, 0. 5M EDTA(pH8.0) 2 ml 高压灭菌 7. 1M Tris(pH8.0) 121.1g Tris 溶于 800 ml H2O,浓盐酸 42 ml 调 pH8.0, 加 入 H2O 至终体积 1000 ml,高压灭菌
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