堆肥式处理( composting piles:在土壤中直接渗入能提高通气保水能力的 支撑材料如树枝、稻草、粪肥、泥炭等易堆腐物质,以提供微生物丰富的营养物 质并使用机械翻动或压力系统充氧,同时加石灰来调节最适pH,使微生物的降解 活性大大提高。经过一段时间的发酵处理,可以使大部分污染物降解。经堆肥处 理消除污染后的土壤又可返回原地或用于农业生产。 生物反应器( Bioreactor):生物反应器是一种特殊的反应器通常为卧式鼓 状、气提式,可分批或连续培养可建在污染现场或异地处理。处理时将污染土壤 转移至生物反应器中加入3—9倍的水混合使其呈泥浆状,同时加入营养物质, 并在充氧的条件下剧烈搅拌,使微生物与底物充分接触,完成处理过程。处理后的 土壤又可通过渗灌系统回灌到土壤中,在回灌过程中加入营养和已经驯化的微生 物并通入氧气使土壤中的生物降解过程更快。生物反应器的降解条件比较容易 控制可以满足微生物降解所需的最适条件,获得最佳处理效果。 3、试述磷脂脂肪酸( phospholipid fatty acids,PLFA)分析技术测定土壤微生 物群落结构多样性的原理和方法。 磷脂由甘油、2分子脂肪酸和1分子磷酸基团(PO4)组成。脂肪酸特别是磷 脂脂肪酸是活细胞的基本组成部分,因为其具有结构多样性,并具有很高的生物 特异性,是有用的生物标记物。它可以作为活性微生物生物量的代表,因为生物 死后磷酸基团很快就消耗掉了,在贮藏物中也没有发现其存在,在生物量组成中 有相对恒定的比例。通过多元统计比较总的PLFA的类型,其在类型上发生变化 就意味着在微生物群落上发生变化。特定的PLFA发生变化,可以作为特定生物 群变化的指示。 PLFA分析技术测定土壤微生物群落结构多样性的方法包括: 初提( Initial Extraction); 1-25g千土 氯仿:甲醇:磷酸缓冲液(20:1.0:0.8) 离心,过滤并除去氯仿相; N2干燥。 脂肪分离( Lipid Separation); 用固相硅酸提取柱 用下述化学试洗提分离脂类: 中性脂类使用氯仿; 醣脂类使用丙酮; 磷脂使用甲醇 皂化/甲基化( Saponification/Methylation); 用2MKOH溶解在MeOH GC分析( GC analysis); 气相色谱分离脂肪酸甲脂 利用标准物确定峰高和出峰时间。 数据分析和解释( Data Analysis and Interpretation)。 多元统计分析数据。堆肥式处理(Composting piles) :在土壤中直接渗入能提高通气保水能力的 支撑材料,如树枝、稻草、粪肥、泥炭等易堆腐物质,以提供微生物丰富的营养物 质,并使用机械翻动或压力系统充氧,同时加石灰来调节最适pH ,使微生物的降解 活性大大提高。经过一段时间的发酵处理,可以使大部分污染物降解。经堆肥处 理消除污染后的土壤又可返回原地或用于农业生产。 生物反应器(Bioreactor) : 生物反应器是一种特殊的反应器,通常为卧式鼓 状、气提式,可分批或连续培养,可建在污染现场或异地处理。处理时将污染土壤 转移至生物反应器中,加入3 —9 倍的水混合使其呈泥浆状,同时加入营养物质, 并在充氧的条件下剧烈搅拌,使微生物与底物充分接触,完成处理过程。处理后的 土壤又可通过渗灌系统回灌到土壤中,在回灌过程中加入营养和已经驯化的微生 物,并通入氧气,使土壤中的生物降解过程更快。生物反应器的降解条件比较容易 控制,可以满足微生物降解所需的最适条件,获得最佳处理效果。 3、试述磷脂脂肪酸（phospholipid fatty acids，PLFA）分析技术测定土壤微生 物群落结构多样性的原理和方法。 磷脂由甘油、2 分子脂肪酸和 1 分子磷酸基团(PO4)组成。脂肪酸特别是磷 脂脂肪酸是活细胞的基本组成部分，因为其具有结构多样性，并具有很高的生物 特异性，是有用的生物标记物。它可以作为活性微生物生物量的代表，因为生物 死后磷酸基团很快就消耗掉了，在贮藏物中也没有发现其存在，在生物量组成中 有相对恒定的比例。通过多元统计比较总的 PLFA 的类型，其在类型上发生变化 就意味着在微生物群落上发生变化。特定的 PLFA 发生变化，可以作为特定生物 群变化的指示。 PLFA 分析技术测定土壤微生物群落结构多样性的方法包括： 初提（Initial Extraction）； 1-25g 干土； 氯仿：甲醇：磷酸缓冲液(2.0:1.0:0.8)； 离心，过滤并除去氯仿相； N2干燥。 脂肪分离（Lipid Separation）； 用固相硅酸提取柱； 用下述化学试洗提分离脂类： 中性脂类使用氯仿； 醣脂类使用丙酮； 磷脂使用甲醇 皂化/甲基化（Saponification/Methylation）； 用 2M KOH 溶解在 MeOH； GC分析（GC analysis）； 气相色谱分离脂肪酸甲脂； 利用标准物确定峰高和出峰时间。 数据分析和解释（Data Analysis and Interpretation）。 多元统计分析数据