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22.(9分)基因工程又称重组DNA技术,是在生物化学、分子生物学和微生物学等 学科的基础上发展起来的生物技术。下图是基因工程示意图,请据图回答下列问 题。 基因表 达载体 繁 转 载体 目的 基因 DNA 锡 已转化的宿主细胞 宿主细胞 (I)对目的基因通过PC℉技术进行扩增时,所用的酶与细胞内同类酶的差异在于 该酶 (2)进行①过程时,需要用限制性内切核酸酶切开 以插入目的基因。完整 的基因表达载体上应有启动子、 、 目的基因和标记基因等特殊 DNA片段,其中启动子是 的部位。 (3)若图中宿主细胞为大肠杆菌,一般情况下②过程不能直接用未处理的大肠杆菌 作为受体细胞,原因是 ;已转化 的宿主细胞(大肠杆菌)指的是己导入 并且在宿主细胞内能稳定 的细胞。 (4)在抗虫作物的培育过程中,常用 法将抗虫基因导入作物受体 细胞。可通过 等技术从分子水平上检测抗虫基因是否己转入受体细 胞。 答案:(1)耐高温(2)载体终止子RNA聚合酶识别和结合(3)未处理的大肠 杆菌吸收质粒(或外源DNA)的能力弱目的基因遗传和表达(4)农杆菌转化 PCR 解析:基因工程的基本步骤包括:目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。据题图分析可知,①过程表 示构建基因表达载体,②过程表示将目的基因导入受体细胞。 (I)利用PCR技术扩增目的基因时,由于PCR过程温度较高,所以需要特殊的耐高 温的DNA聚合酶。(2)在构建基因表达载体时,需要用限制性内切核酸酶将载体 切开,以便目的基因插入:基因表达载体中的启动子是RNA聚合酶识别和结合的 部位。(3)若受体细胞是大肠杆菌,由于未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的 能力弱,则需要用C+处理大肠杆菌细胞,使之处于一种能吸收周围环境中DNA 分子的生理状态。已转化的宿主细胞(大肠杆菌)指的是已导入目的基因并且目 的基因能稳定遗传和表达的细胞。(4)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化 法。可通过PCR等技术从分子水平上检测抗虫基因是否已转入受体细胞。22.(9 分)基因工程又称重组 DNA 技术,是在生物化学、分子生物学和微生物学等 学科的基础上发展起来的生物技术。下图是基因工程示意图,请据图回答下列问 题。 (1)对目的基因通过 PCR 技术进行扩增时,所用的酶与细胞内同类酶的差异在于 该酶 。 (2)进行①过程时,需要用限制性内切核酸酶切开 以插入目的基因。完整 的基因表达载体上应有启动子、 、目的基因和标记基因等特殊 DNA 片段,其中启动子是 的部位。 (3)若图中宿主细胞为大肠杆菌,一般情况下②过程不能直接用未处理的大肠杆菌 作为受体细胞,原因是 ;已转化 的宿主细胞(大肠杆菌)指的是已导入 并且在宿主细胞内能稳定 的细胞。 (4)在抗虫作物的培育过程中,常用 法将抗虫基因导入作物受体 细胞。可通过 等技术从分子水平上检测抗虫基因是否已转入受体细 胞。 答案:(1)耐高温 (2)载体 终止子 RNA 聚合酶识别和结合 (3)未处理的大肠 杆菌吸收质粒(或外源 DNA)的能力弱 目的基因 遗传和表达 (4)农杆菌转化 PCR 解析:基因工程的基本步骤包括:目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、 将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。据题图分析可知,①过程表 示构建基因表达载体,②过程表示将目的基因导入受体细胞。 (1)利用 PCR 技术扩增目的基因时,由于 PCR 过程温度较高,所以需要特殊的耐高 温的 DNA 聚合酶。(2)在构建基因表达载体时,需要用限制性内切核酸酶将载体 切开,以便目的基因插入;基因表达载体中的启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的 部位。(3)若受体细胞是大肠杆菌,由于未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源 DNA)的 能力弱,则需要用 Ca2+处理大肠杆菌细胞,使之处于一种能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态。已转化的宿主细胞(大肠杆菌)指的是已导入目的基因并且目 的基因能稳定遗传和表达的细胞。(4)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化 法。可通过 PCR 等技术从分子水平上检测抗虫基因是否已转入受体细胞
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