协和医学杂志 期,此时需考虑核酸检测结果存疑。出现核酸检测假 阴性的原因及应对建议主要有以下几方面:(1)标 参考文献 本质量差。采集上呼吸道的口、鼻咽拭子等部位标 本时,推荐采集鼻咽拭子进行病毒核酸检测,为了[1] Malik Ys, Sircar S, Bhat S,eta. Emerging novel corona- 提高检测阳性率,建议采集同一患者多部位标本 rus (2019-nCoV): current scenario, evolutionary perspec- (口咽拭子、鼻咽拭子、鼻腔拭子等)合并检测 tive based ongenome analysis and recent developments [J] 对于有消化道症状的疑似患者,可同时采集粪便或 vetQ,2020,8:1-12 肛拭子进行检测。(2)标本采集保存不当,没有[2]LR,aa0x,L, et al. Genomic characterisation andel. 正确保存、运输和处理标本。推荐4℃运送标本 (因RNA易降解)。(3)技术本身原因,如病毒变 565-574. 异、PCR抑制等。由于2019-nCo为单股正链RNA[3]中华人民共和国国家卫生健康委员会新型冠状病毒肺 病毒,分子量大,具有易变异的特性,传播过程中 炎诊疗方案(试行第六版)[S/OL].htp://ww. 可能会产生核酸序列的变异,若处于核酸扩增的引 nhe.gov.cn/yzyg/s7653p/202002/8334a8326dd94d329f 物结合区,就会出现假阴性结果。建议针对多 351d7da8aefc 2. shtml 个核酸区域进行扩增,可有效避免核酸变异对检测[4]YuF,DL, Ojcius DM,eta. Measures for diagnosing and 结果的影响。因此,当核酸检测结果为阴性时,只 treating infections by a novel coronavirus responsible for a 可报告本次检测结果阴性,不可排除2019-nCoV感 pneumonia outbreak originating in Wi 染,需多次重复确认。(4)患者有其他疾病 robes Infect, 2020. doi: 10. 1016/j. micinf. 2020. 01. 003 已发现类风湿因子引起lgM弱阳性或阳性的病例。 [ Epub ahead of print 5.2.2核酸阴性,IgM阴性、lgG阳性 [5]何超,江虹,谢轶,等.新型冠状病毒肺炎诊治的实验室检 验路径探讨[JOL].中国呼吸与危重监护杂志,200 提示患者可能既往感染2019CoV,但已恢复或 p: //kns cnki. net/kems/detail/51. 1631. R. 20200221. 1322 体内病毒被清除,免疫应答产生的IgG维持时 002. html. Epub ahead of print] 仍存在于血液中而被检测到。 6]黄丹.献血者血液样本核酸检测降低经血传播感染性疾 5.2.3核酸阴性,IgM弱阳性、lgG阴性 病风险的效果分析[J].泰山医学院学报,2017, 提示患者初次感染载量极低的2019-nCoV并处于 早期,病毒载量低于核酸检测下限,机体产生少量 I Murat JB, Dard C, Fricker Hidalgo H, et al. Comparison of lgM,尚未产生lgG;或由于患者自身类风湿因子阳 the vidas system and two recent fully automated assays for di- 性等引起的lgM假阳性 gnosis and follow-up of toxoplasmosis in pregnant women 5.2.4核酸阴性,IgM阳性、IgG阳性 and newborns [J]. Clin Vaccine Immunol, 2013, 20 1203-1212. 患者近期曾感染2019-nCoV并处于恢复期,体内 达HIV-1gag蛋白的重 病毒被清除,lgM尚未减低至检测下限;或核酸检测 组乳酸乳球菌诱导小鼠产生体液免疫应答[J].细胞与 结果假阴性,患者处于感染活跃期。 分子免疫学杂志,2014,30:1142-1145 [9]邱峰,王慧君,张子康,等.新型冠状病毒SARS-CoV-2 6结语 实验室检测技术[J/OL].南方医科大学学报,2020 http://kns.enkinet/kems/detail/44.1627.r.20200220 综上所述,相关医疗机构应尽早建立2019-nCoV 1738.004. htmL. Epub ahead of print 血清抗体检测技术。抗体检测可用于2019-nCoV核酸10金品ELSA法和化学发光法对血清中HV田2抗 检测阴性疑似病例的补充检测或在疑似病例确诊时与 体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测分析[J].中国医 核酸检测协同应用。在 COVID-19的不同疾病进展阶 药指南,2018,4:49 段,核酸和抗体检测的效率不尽相同,两者协同使[1]姜大娥探讨 ELISA和化学发光法对血清中HNHV 2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测[J.中国卫生检 用,可取长补短,提高诊断效率,监测疾病进展。而 验杂志,2012,22:137-138,145 正确解读联合检测结果,可提高2019nCoY的快速诊[12]金建平单克隆抗体亲和力的测定及其意义[门]生物 断和鉴别诊断能力,更好地了解病毒载量和疾病进 工程学报,1987,3:110-11 展,指导临床诊疗工作 [13 Li Z, Yi Y, Luo X, et al. Development and Clinical Appli-协 和 医 学 杂 志 ４ 期ꎬ 此时需考虑核酸检测结果存疑ꎮ 出现核酸检测假 阴性的原因及应对建议主要有以下几方面: (１) 标 本质量差ꎮ 采集上呼吸道的口、 鼻咽拭子等部位标 本时ꎬ 推荐采集鼻咽拭子进行病毒核酸检测ꎬ 为了 提高检测阳性率ꎬ 建议采集同一患者多部位标本 (口咽拭子、 鼻咽拭子、 鼻腔拭子等) 合并检测ꎻ 对于有消化道症状的疑似患者ꎬ 可同时采集粪便或 肛拭子进行检测[３] ꎮ (２) 标本采集保存不当ꎬ 没有 正确保存、 运输和处理标本ꎮ 推荐 ４ ℃ 运送标本 (因 ＲＮＡ 易降解) ꎮ ( ３) 技术本身原因ꎬ 如病毒变 异、 ＰＣＲ 抑制等ꎮ 由于 ２０１９￣ｎＣｏＶ 为单股正链 ＲＮＡ 病毒ꎬ 分子量大ꎬ 具有易变异的特性ꎬ 传播过程中 可能会产生核酸序列的变异ꎬ 若处于核酸扩增的引 物结合区ꎬ 就会出现假阴性结果[３０] ꎮ 建议针对多 个核酸区域进行扩增ꎬ 可有效避免核酸变异对检测 结果的影响ꎮ 因此ꎬ 当核酸检测结果为阴性时ꎬ 只 可报告本次检测结果阴性ꎬ 不可排除 ２０１９￣ｎＣｏＶ 感 染ꎬ 需多次重复确认[３１] ꎮ ( ４) 患者有其他疾病ꎬ 已发现类风湿因子引起 ＩｇＭ 弱阳性或阳性的病例ꎮ ５􀆰 ２􀆰 ２ 核酸阴性ꎬ ＩｇＭ 阴性、 ＩｇＧ 阳性 提示患者可能既往感染 ２０１９￣ｎＣｏＶꎬ 但已恢复或 体内病毒被清除ꎬ 免疫应答产生的 ＩｇＧ 维持时间长ꎬ 仍存在于血液中而被检测到ꎮ ５􀆰 ２􀆰 ３ 核酸阴性ꎬ ＩｇＭ 弱阳性、 ＩｇＧ 阴性 提示患者初次感染载量极低的 ２０１９￣ｎＣｏＶ 并处于 早期ꎬ 病毒载量低于核酸检测下限ꎬ 机体产生少量 ＩｇＭꎬ 尚未产生 ＩｇＧꎻ 或由于患者自身类风湿因子阳 性等引起的 ＩｇＭ 假阳性ꎮ ５􀆰 ２􀆰 ４ 核酸阴性ꎬ ＩｇＭ 阳性、 ＩｇＧ 阳性 患者近期曾感染 ２０１９￣ｎＣｏＶ 并处于恢复期ꎬ 体内 病毒被清除ꎬ ＩｇＭ 尚未减低至检测下限ꎻ 或核酸检测 结果假阴性ꎬ 患者处于感染活跃期ꎮ ６ 结语 综上所述ꎬ 相关医疗机构应尽早建立 ２０１９￣ｎＣｏＶ 血清抗体检测技术ꎮ 抗体检测可用于 ２０１９￣ｎＣｏＶ 核酸 检测阴性疑似病例的补充检测或在疑似病例确诊时与 核酸检测协同应用ꎮ 在 ＣＯＶＩＤ￣ １９ 的不同疾病进展阶 段ꎬ 核酸和抗体检测的效率不尽相同ꎬ 两者协同使 用ꎬ 可取长补短ꎬ 提高诊断效率ꎬ 监测疾病进展ꎮ 而 正确解读联合检测结果ꎬ 可提高 ２０１９￣ｎＣｏＶ 的快速诊 断和鉴别诊断能力ꎬ 更好地了解病毒载量和疾病进 展ꎬ 指导临床诊疗工作ꎮ 参 考 文 献 [１] Ｍａｌｉｋ ＹＳꎬ Ｓｉｒｃａｒ Ｓꎬ Ｂｈａｔ Ｓꎬ ｅｔ ａｌ. Ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｎｏｖｅｌ ｃｏｒｏｎａ￣ ｖｉｒｕｓ (２０１９￣ｎＣｏＶ): ｃｕｒｒｅｎｔ ｓｃｅｎａｒｉｏꎬ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ ｐｅｒｓｐｅｃ￣ ｔｉｖｅ ｂａｓｅｄ ｏｎｇｅｎｏｍｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｒｅｃｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ [Ｊ]. Ｖｅｔ Ｑꎬ ２０２０ꎬ ８: １￣ １２. [２] Ｌｕ Ｒꎬ Ｚｈａｏ Ｘꎬ Ｌｉ Ｊꎬ ｅｔ ａｌ. Ｇｅｎｏｍｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ ａｎｄｅｐｉ￣ ｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ２０１９ ｎｏｖｅｌ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ: ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｖｉｒｕｓｏ￣ ｒｉｇｉｎｓ ａｎｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｂｉｎｄｉｎｇ [ Ｊ ]. Ｌａｎｃｅｔꎬ ２０２０ꎬ ３９５: ５６５￣ ５７４. [３] 中华人民共和国国家卫生健康委员会. 新型冠状病毒肺 炎诊 疗 方 案 ( 试 行 第 六 版) [ Ｓ / ＯＬ ]. ｈｔｔｐ:/ / ｗｗｗ􀆰 ｎｈｃ􀆰 ｇｏｖ􀆰 ｃｎ / ｙｚｙｇｊ/ ｓ７６５３ｐ / ２０２００２ / ８３３４ａ８３２６ｄｄ ９４ｄ３２９ｄｆ ３５１ｄ７ｄａ８ａｅｆｃ２􀆰 ｓｈｔｍｌ. [４] Ｙｕ Ｆꎬ Ｄｕ Ｌꎬ Ｏｊｃｉｕｓ ＤＭꎬ ｅｔ ａｌ. Ｍｅａｓｕｒｅｓ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ ａｎｄ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｂｙ ａ ｎｏｖｅｌ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ ｆｏｒ ａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｏｕｔｂｒｅａｋ ｏｒｉｇｉｎａｔｉｎｇ ｉｎ Ｗｕｈａｎꎬ Ｃｈｉｎａ [ Ｊ]. Ｍｉ￣ ｃｒｏｂｅｓ Ｉｎｆｅｃｔꎬ ２０２０. ｄｏｉ: １０􀆰 １０１６ / ｊ􀆰 ｍｉｃｉｎｆ􀆰 ２０２０􀆰 ０１􀆰 ００３. [Ｅｐｕｂ ａｈｅａｄ ｏｆ ｐｒｉｎｔ]. [５] 何超ꎬ 江虹ꎬ 谢轶ꎬ 等. 新型冠状病毒肺炎诊治的实验室检 验路径探讨 [Ｊ/ ＯＬ]. 中国呼吸与危重监护杂志ꎬ ２０２０. ｈｔｔｐ:/ / ｋｎｓ􀆰 ｃｎｋｉ􀆰 ｎｅｔ/ ｋｃｍｓ/ ｄｅｔａｉｌ/ ５１􀆰 １６３１􀆰 Ｒ􀆰 ２０２００２２１􀆰 １３２２. ００２􀆰 ｈｔｍｌ. [Ｅｐｕｂ ａｈｅａｄ ｏｆ ｐｒｉｎｔ]. 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