酶工程电子教案 第三章酶的提取与分离纯化 ◆酶的提取与分离纯化是指将酶从细胞或其它含酶原料中提取出来,再与杂质分开,而 获得所要求的酶制品的过程。 ◆主要内容包括细胞破碎,酶的提取,离心分离,过滤与膜分离,沉淀分离,层析分离, 电泳分离,萃取分离,浓缩,干燥、结晶等 1细胞破碎 ◆细胞破碎方法可以分为机械破碎法,物理破碎法,化学破碎法和酶促破碎法等如表 3-1所示 表3-1细胞破碎方法及其原理 分类 细胞破碎方法 细胞破碎原理 机械破碎法 捣碎法 通过机械运动产生的剪切力,使组织、 研磨法 细胞破碎。 匀浆法 物理破碎法 温度差破碎法 通过各种物理因素的作用,使组织、 压力差破碎法 细胞的外层结构破坏,而使细胞破碎。 迢声波破碎法 化学破碎法 添加有机溶剂 通过各种化学试剂对细胞膜的作用, 添加表面活性剂 而使细胞破碎 酶促破碎法 自溶法 通过细胞本身的酶系或外加酶制剂的 外加酶制剂法 催化作用,使细胞外层结构受到破坏,1 酶工程电子教案 第三章 酶的提取与分离纯化 ◆酶的提取与分离纯化是指将酶从细胞或其它含酶原料中提取出来，再与杂质分开，而 获得所要求的酶制品的过程。 ◆主要内容包括细胞破碎，酶的提取，离心分离，过滤与膜分离，沉淀分离，层析分离， 电泳分离，萃取分离，浓缩，干燥、结晶等。 1.细胞破碎 ◆细胞破碎方法可以分为机械破碎法，物理破碎法，化学破碎法和酶促破碎法等,如表 3-1 所示。 表 3-1 细胞破碎方法及其原理 分 类 细胞破碎方法 细胞破碎原理 机械破碎法 捣碎法 研磨法 匀浆法 通过机械运动产生的剪切力，使组织、 细胞破碎。 物理破碎法 温度差破碎法 压力差破碎法 超声波破碎法 通过各种物理因素的作用，使组织、 细胞的外层结构破坏，而使细胞破碎。 化学破碎法 添加有机溶剂 添加表面活性剂 通过各种化学试剂对细胞膜的作用， 而使细胞破碎 酶促破碎法 自溶法 外加酶制剂法 通过细胞本身的酶系或外加酶制剂的 催化作用，使细胞外层结构受到破坏