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温度达20℃左右。 3.作用:混和完毕后,将玻板置恒温箱中或采用别的办法适当加温,使温度达到30℃左右 3-5min内记录反应结果。 4.对照:每次试验须用标准阳性血清和阴性血清以及生理盐水作对照。 5.结果判定:按下列标准记录反应结果。 十十十十:出现大的凝集块,液体完全透明,即100%凝集。 十十十:有明显凝集块,液体几乎完全透明,即75%凝集。 ++:有可见凝集块,液体不甚透明,即50%凝集。 十:液体混浊,有小的颗粒状物,即25%凝集。 一:液体均匀混浊,无凝集现象。 6.平板凝集试验与试管凝集试验的关系见实验指导表1-2。 7.判定标准:同试管凝集试验。 8.注意:对于阳性及可疑的被检血清需用试管凝集试验进行验证。 (三)虎红平板凝集试验 这种试验是快速平板凝集试验。抗原是布氏杆菌加虎红制成。虎红平板凝集试验可与试管凝集 试验及补体结合试验效果相比,具有操作简单、快速、特异性强的优点, 1.被检血清和布氏杆菌病虎红平板凝集抗原各30L滴于玻璃板的方格内,每份血清各用一支 牙签或火柴棒混合均匀。在室温(20℃)4-10min内记录反应结果。同时以阳、阴性血清作对照。 2。结果判定:在阳性血清及阴性血清试验结果正确的前提下,被检血清出现任何程度的凝集 现象均判为阳性,完全不凝集的判为阴性,无可疑反应。 3.注意:抗原用前充分摇匀,抗原和被检血清用前应放室温30-60min后再进行试验。 (四)鸡白痢平板凝集试验 1,被检鸡血清和鸡白痢平板凝集抗原各1滴(约30L)滴于玻板或载玻片上,用牙签或火柴棒 充分混合。 2.结果判定:在室温(20℃)下,观察30-60s,凝集者为阳性,不凝集者为阴性 [思考题] 1.凝集反应的原理是什么? 2.哪些因素影响细菌凝集试验? 3.凝集试验中为什么要设阳性、阴性血清及抗原对照? 实验二琼脂扩散试验、对流免疫电泳 温度达20℃左右。 3. 作用:混和完毕后,将玻板置恒温箱中或采用别的办法适当加温,使温度达到30℃左右, 3-5min内记录反应结果。 4. 对照:每次试验须用标准阳性血清和阴性血清以及生理盐水作对照。 5. 结果判定:按下列标准记录反应结果。 ++++:出现大的凝集块,液体完全透明,即100% 凝集。 +++:有明显凝集块,液体几乎完全透明,即75% 凝集。 ++:有可见凝集块,液体不甚透明,即50% 凝集。 +:液体混浊,有小的颗粒状物,即25% 凝集。 -:液体均匀混浊,无凝集现象。 6. 平板凝集试验与试管凝集试验的关系见实验指导表1-2。 7. 判定标准:同试管凝集试验。 8. 注意:对于阳性及可疑的被检血清需用试管凝集试验进行验证。 (三)虎红平板凝集试验 这种试验是快速平板凝集试验。抗原是布氏杆菌加虎红制成。虎红平板凝集试验可与试管凝集 试验及补体结合试验效果相比,具有操作简单、快速、特异性强的优点。 1. 被检血清和布氏杆菌病虎红平板凝集抗原各30mL滴于玻璃板的方格内,每份血清各用一支 牙签或火柴棒混合均匀。在室温(20℃)4-10min内记录反应结果。同时以阳、阴性血清作对照。 2. 结果判定:在阳性血清及阴性血清试验结果正确的前提下,被检血清出现任何程度的凝集 现象均判为阳性,完全不凝集的判为阴性,无可疑反应。 3. 注意:抗原用前充分摇匀,抗原和被检血清用前应放室温30-60min后再进行试验。 (四)鸡白痢平板凝集试验 1. 被检鸡血清和鸡白痢平板凝集抗原各1滴(约30mL)滴于玻板或载玻片上,用牙签或火柴棒 充分混合。 2. 结果判定:在室温(20℃)下,观察30-60s,凝集者为阳性,不凝集者为阴性。 [思考题] 1. 凝集反应的原理是什么? 2. 哪些因素影响细菌凝集试验? 3. 凝集试验中为什么要设阳性、阴性血清及抗原对照? 实验二 琼脂扩散试验、对流免疫电泳
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