限制酶主要来自细菌等微生物体。因为微生物运载体结合(以质归纳总结 容易受到外源DNA的干扰,而限制酶可以切|粒为运载体)。能力 除这些外源DNA,使其失活,是对自身生存的(3)将目的基因 一种保护。 ECoR I只是已知多种限制酶中的一导入受体细胞 种。 EcoR I是一种从细菌中发现的能在特定位导入方法:借鉴细 置上切割DNA分子的酶,其特定的识别序列菌或病毒侵染细 是 GAATTC,特定的切点是在G和A之间。胞的途径。 探究1:限制酶的功能特点中指出两个“特定”,导入过程:运载体 这两个“特定”指什么? 为质粒,受体细胞 探究2:限制酶切割DNA分子后产生了什么?为细菌。(4)目 探究3:用同种限制酶切割的DNA末端需要用的基因的检测和 什么酶连接缝合呢? 表达 2基因针线”一—DNA连接酶 检测:通过检测标 提问2:DNA连接酶连接的是两个脱氧核苷酸记基因的有无,来 分子的什么部位? 判断目的基因是 连接的部位:磷酸二酯键(梯子的扶手),不否导入 是氢键(梯子的踏板)。 表达:通过特定性 结果:两个相同的黏性未端的连接 状的产生与否来 过渡:通过讨论,我们知道基因剪刀—限制酶确定目的基因是 切割目的基因,并通过DNA连接酶将来源不否表达。 同的两个基因连接起来,但是目的基因怎样才 能导入受体细胞? 3.基因运输工具”—运载体 提问:常用的运载体有哪些? 展示质粒的结构模式图,介绍 探究4:充当运载体应该具有什么特点? 作用:将外源基因送入受体细胞。 具备的条件:能在宿主细胞内复制并稳定地保 存;具有多个限制酶切点;具有某些标记基因。限制酶主要来自细菌等微生物体。因为微生物 容易受到外源 DNA 的干扰，而限制酶可以切 除这些外源 DNA，使其失活，是对自身生存的 一种保护。EcoRⅠ只是已知多种限制酶中的一 种。EcoRⅠ是一种从细菌中发现的能在特定位 置上切割 DNA 分子的酶，其特定的识别序列 是 GAATTC，特定的切点是在 G 和 A 之间。 探究 1：限制酶的功能特点中指出两个“特定”， 这两个“特定”指什么？ 探究 2：限制酶切割 DNA 分子后产生了什么？ 探究 3：用同种限制酶切割的 DNA 末端需要用 什么酶连接缝合呢？ 2.“基因针线”——DNA 连接酶 提问 2：DNA 连接酶连接的是两个脱氧核苷酸 分子的什么部位？ 连接的部位：磷酸二酯键（梯子的扶手），不 是氢键（梯子的踏板）。 结果：两个相同的黏性未端的连接 过渡：通过讨论，我们知道基因剪刀—限制酶 切割目的基因，并通过 DNA 连接酶将来源不 同的两个基因连接起来，但是目的基因怎样才 能导入受体细胞？ 3.“基因运输工具”——运载体 提问：常用的运载体有哪些？ 展示质粒的结构模式图，介绍 探究 4：充当运载体应该具有什么特点？ 作用：将外源基因送入受体细胞。 具备的条件：能在宿主细胞内复制并稳定地保 存；具有多个限制酶切点；具有某些标记基因。 运载体结合（以质 粒为运载体）。 （3）将目的基因 导入受体细胞。 导入方法：借鉴细 菌或病毒侵染细 胞的途径。 导入过程：运载体 为质粒，受体细胞 为细菌。（4）目 的基因的检测和 表达 检测：通过检测标 记基因的有无，来 判断目的基因是 否导入。 表达：通过特定性 状的产生与否来 确定目的基因是 否表达。 归纳总结 能力