中国科技论文统计源期刊 实验技术与管理 Vol 23 No I (中国科技核心期刊) EXPERIMENTAL TECHNOLOGY AND MANAGEMENT 」AN.2006 激光扫瞄共聚焦显微技术实验教学的思考 刘继红',汪成楚2 (1.北京大学医药卫生分析中心,北京100083;2.北京邮电大学资产管理处,北京100876) 设激光共聚焦技术实验课,通过仪器演示和实验操作,帮助学生理解课堂的理论教学内容,了 解和掌握这门新技术,为他们在未来科研工作中利用该技术进行科学研究奠定基础 关键词:激光扫瞄;共聚焦显微技术;原理;实验教学 中图分类号:G642.423文献标识码:C文章编号:1002-4956(2006)01-0086-02 Thought of Laser Scanning Confocal Microscopy Experiment Teaching LIU Ji-hong, WANG Cheng-chu2 (1. Peking University Medical and Health Analysis Center, Beijing 100083, China; 2. Department of Property Man- agement of Beijing University of Post Technology, Beijing 100876, Chin Abstract: We open the experiment of laser scanning confocal microscopy through which students ean understand the theory and perform the technique of laser scanning confocal microscopy in order that they can applicate the teohnique Key words: laser scanning; confocal microscopy; theory; experiment teaching 激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)是80年代 我校根据科研的实际需要,为医学部的研究生 发展起来的目前世界上先进的细胞分子生物学分析开设了激光共聚焦技术的实验课,目的在于帮助学 仪器,是以光学为基础,融机械、电子、计算机为生理解课堂的教学内容,提高激光共聚焦显微技术 一体的高精度现代化显微测试仪器,它克服了传统的应用能力,以便日后在科研中加以充分利用。 以成像的缺点,把物体分为若千光学断层,逐层扫1激光扫描共聚焦显微镜的工作原理 描成像。激光共聚焦显微技术是一种对荧光标记的 激光共聚焦显微镜是对于荧光标记的细胞和组 细胞和组织进行形态学的定位与定量分析的高精度织进行形态学定位与定量分析的一种先进的仪器。 显微成像技术。近十年来,人们已广泛应用该技术它使用激光作为光源,采用点照明和点探测技术 来观察和分析细胞内的微细结构和分子在细胞内的并用光电倍增管完成信号的转化和放大,用计算机 分布,观察细胞内离子、蛋白分子的变化,包括细软件采集和处理图象并进行数据分析。激光通过一 胞内钙、活性氧、转录因子、表面分子、细胞凋个照明针孔到达样品,样品只被一个具有精密几何 亡、细胞膜流动性、胞内分子的运动、细胞间的缝形状的光点照射焦平面上,只有被照射到的特定点 隙连接、蛋白间的相互作用等。共聚焦的分析研究所发射的荧光通过探测针孔到达检测器,该点以外 已经涉及到生物医学的几乎所有领域。由于激光共的任何发射荧光均被该针孔阻挡。照明针孔与探测 聚焦显微镜能对细胞和组织进行无损伤的连续光学针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,这就是 切片,并且可以对生活状态的细胞进行实时的动态激光扫描共聚焦显微镜系统中共焦的真正含义。计 观察,使它在生物医学的研究中占有独特的地位,算机以像点的方式将成像点显示在屏幕上,由光路 但目前科研人员对激光共聚集技术的运用还远远不中的扫描系统在整个样品上扫描,在显示器上产生 够,因此,在科研人员中普及激光共聚焦技术是非一幅完整图像。只要载物台沿着Z轴上下移动, 常必要的。 将样品新的一个层面移到共焦面上,样品的这个新 收稿日期:2005-07-07修改日期:20050916 层面又成像在显示器上。随着Z轴的不断移动 作者简介:刘继红(1973—),女,礦士,助理研究员 就可得到样品不同层面连续的光切图像。我们将从 万方数据万方数据