1.内容 (1)限制性核酸内切酶 (2)DNA连接酶 (3)DNA聚合酶 (4)修饰酶 要求：掌握限制性核酸内切酶的种类、特点和用途。熟悉DNA连接酶及各种DNA聚合酶的特点，了 解常用的修饰酶的作用特点。 2. 重点内容：各种酶的活性特点及用途。 3.难点内容：各种酶的活性特点。 (六)基因工程相关技术 1.内容 (1)PCR技术 (2)DNA序列测定 (3)DNA合成 (4)核酸分子杂交技术 要求：掌握PCR技术的原理及方法、引物设计的基本要求，掌握DNA序列测定的原理，了解DNA合 成方法的原理，掌握核酸分子杂交的原理， ”常田的丸衣方法 重点内容： 引物设计的基本 要求，D A序列测定的原理（酶法与化学法），核酸杂交原理 3.难点内容：引物设计的基本要求，DN序列测定的原理（酶法与化学法），核酸杂交原理。 (七)基因克隆载体 1.内容 (1)岳物载林 (2)噬菌体载体 (3)酵母载体 (4)病毒载体 要求：掌握质粒载体的基本特征，熟悉常见质粒载体，掌握噬菌体载体一般特性，了解常用的噬菌 体载体 了解酵母载体的特点及用途。 了解病毒载体的特点及用途 重点内容：各种载体的结构特点、特点与用途。 3.难点内容：各种载体的结构特点。 (八)目的基因克隆 1.内容 (1)克隆基因的一般方法 (2)目的基因片段与载体的连接 (3)构建文库克隆目的基因 要求：掌握克隆基因的一般方法，掌握目的基因片段与载体的连接方法。了解基因文库与cDNA文库 克隆基因的方法」 重点内容：基因克隆的方法 目的基因片段与载体的连接方法 3 重难点内容：基因克隆的方法 九)目的基因克隆的其他方法 1.内容 (1)mRNA差导显示技术 (2)差别杂交和扣除杂交克隆目的基因 (3)代表性差别分析技术克隆目的基因 (4)抑制性减法杂交技术 要求：掌握RNA差异显示技术的原理及方法，熟悉差别杂交和扣除杂交方法，了解代表性差别分 析技术和抑制性减法杂交技术克隆基因的方法 重点内容 mRNA差异显示技术的原理。 差别杂交和扣除杂交的方法，代表性差别分析技术及抑 制性减法杂交技术的原理。 3.难点内容：RNA差异显示技术的原理。代表性差别分析技术及抑制性减法杂交技术的原理.1．内容 （1）限制性核酸内切酶 （2）DNA连接酶 （3）DNA聚合酶 （4）修饰酶 要求：掌握限制性核酸内切酶的种类、特点和用途。熟悉DNA连接酶及各种DNA聚合酶的特点，了 解常用的修饰酶的作用特点。 2．重点内容：各种酶的活性特点及用途。 3．难点内容：各种酶的活性特点。 （六）基因工程相关技术 1．内容 （1）PCR技术 （2）DNA序列测定 （3）DNA合成 （4）核酸分子杂交技术 要求：掌握PCR技术的原理及方法、引物设计的基本要求，掌握DNA序列测定的原理，了解DNA合 成方法的原理，掌握核酸分子杂交的原理，了解常用的杂交方法。 2．重点内容：引物设计的基本要求，DNA序列测定的原理（酶法与化学法），核酸杂交原理。 3．难点内容：引物设计的基本要求，DNA序列测定的原理（酶法与化学法），核酸杂交原理。 （七）基因克隆载体 1．内容 （1）质粒载体 （2）噬菌体载体 （3）酵母载体 （4）病毒载体 要求：掌握质粒载体的基本特征，熟悉常见质粒载体，掌握噬菌体载体一般特性，了解常用的噬菌 体载体。了解酵母载体的特点及用途。了解病毒载体的特点及用途。 2．重点内容：各种载体的结构特点、特点与用途。 3．难点内容：各种载体的结构特点。 （八）目的基因克隆 1．内容 （1）克隆基因的一般方法 （2）目的基因片段与载体的连接 （3）构建文库克隆目的基因 要求：掌握克隆基因的一般方法，掌握目的基因片段与载体的连接方法。了解基因文库与cDNA文库 克隆基因的方法。 2．重点内容：基因克隆的方法。目的基因片段与载体的连接方法。 3．重难点内容：基因克隆的方法。 （九）目的基因克隆的其他方法 1．内容 （1）mRNA差异显示技术 （2）差别杂交和扣除杂交克隆目的基因 （3）代表性差别分析技术克隆目的基因 （4）抑制性减法杂交技术 要求：掌握mRNA差异显示技术的原理及方法，熟悉差别杂交和扣除杂交方法，了解代表性差别分 析技术和抑制性减法杂交技术克隆基因的方法。 2．重点内容：mRNA差异显示技术的原理。差别杂交和扣除杂交的方法，代表性差别分析技术及抑 制性减法杂交技术的原理。 3．难点内容：mRNA差异显示技术的原理。代表性差别分析技术及抑制性减法杂交技术的原理