待测 空白 标准品 点样顺序 样品 斑点杂交操作步骤 待测 空白 标准品 样品 样品点样于C膜 4μL,室温放置约 加入封阻液2mL, 吸去封阻液，洗涤 30分钟，待样品完 摇床摆动，封闭6 液2mL洗膜3分钟 全吸收 分钟 ×3次 加CAT抗体液 吸去抗体液，洗涤 加HRP标记二抗液 0.75mL,室温摆 液2mL洗膜3分钟 0.75mL,室温摆 动孵育60分钟 ×3次 动孵育30分钟 吸去二抗液， 洗涤液2mL 加底物液1支（约 用水漂洗终止反应 1mL)显色 洗膜3分钟×3次斑点杂交操作步骤 样品点样于NC膜 4μL，室温放置约 30分钟，待样品完 全吸收 加入封阻液2mL， 摇床摆动，封闭6 分钟 吸去封阻液，洗涤 液2mL洗膜3分钟 ×3次 加CAT抗体液 0.75mL，室温摆 动孵育60分钟 吸去抗体液，洗涤 液2mL洗膜3分钟 ×3次 加HRP标记二抗液 0.75mL，室温摆 动孵育30分钟 吸去二抗液， 洗涤液2mL 洗膜3分钟 ×3次 加底物液1支（约 1mL）显色 用水漂洗终止反应 点样顺序