计算机、网络资源。 (四)实验的要点与教学建议 掌握ClustalW/ClustalX进行多序列比对和分子进化遗传分析，绘制亲缘树。 实验四、目的基因限制性酶切位点分析，PC℉扩增引物、反应体系和条件设计 (一)实验目的 通过本实验学习限制性核酸内切酶位点分析、PC℉扩增特异引物设计及PCR反应体系和条件的 方法技术。 (二)实验内容 利用DNAClub软件分析实验一所得的目的基因的酶切位点、设计一对扩增该基因的特异引物， PCR扩增反应体系和反应条件。 (三)实验仪器与材料 计算机、网络资源。 (四)实验的要点与教学建议 掌握DNAClub软件使用方法。 实验五、工程菌的制备及质粒DNM的提取 (一)实验目的 熟悉农杆菌的培养特征，掌握其培养方法：掌握提取质粒DA的方法和检测方法。 (二)实验内容 (1)工程菌的制备：(2)质粒DNA的提取。 （三)实验仪器与材料 含有PBI121-35-SPt载体的农杆菌LBA4404保存菌种，卡那霉素(Kan),酵母提取物，蛋白胨， 氯化钠，摇床，超净工作台，试管，恒温培养箱、恒温摇床、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、台式 高速离心机、台式小型振荡器、EP管(1.5mL微量离心管)、加样器(20uL~lmL)、吸头。 (四)实验的要点与教学建议 掌握农杆菌培养方法及提取质粒DNA的方法。 实验六、目的基因的PCR扩增 (一)实验目的 掌握PCR的基本原理、PCR反应体系的配制和PCR反应程序的设置。 (二)实验内容 (1)配制PCR反应液：(2)设置PCR反应体系进行PCR反应：(3)琼脂糖凝胶电泳。 (三)实验仪器与材料 微量移液器、台式高速离心机、PC℉仪、电泳仪、电泳槽、紫外检测仪。 (四)实验的要点与教学建议 掌握PCR反应体系的配制和PCR反应程序的设置方法。 实验七、限制性内切酶酶切目的基因 (一)实验目的 学习和掌握进行DNA酶切的方法与操作技术。计算机、网络资源。 （四）实验的要点与教学建议 掌握 ClustalW/ClustalX 进行多序列比对和分子进化遗传分析，绘制亲缘树。 实验四、目的基因限制性酶切位点分析，PCR 扩增引物、反应体系和条件设计 （一） 实验目的 通过本实验学习限制性核酸内切酶位点分析、PCR 扩增特异引物设计及 PCR 反应体系和条件的 方法技术。 （二）实验内容 利用 DNAClub 软件分析实验一所得的目的基因的酶切位点、设计一对扩增该基因的特异引物， PCR 扩增反应体系和反应条件。 （三）实验仪器与材料 计算机、网络资源。 （四）实验的要点与教学建议 掌握 DNAClub 软件使用方法。 实验五、工程菌的制备及质粒 DNA 的提取 （一）实验目的 熟悉农杆菌的培养特征，掌握其培养方法；掌握提取质粒 DNA 的方法和检测方法。 （二）实验内容 （1）工程菌的制备；（2）质粒 DNA 的提取。 （三）实验仪器与材料 含有 PBI121-35-SPt 载体的农杆菌 LBA4404 保存菌种，卡那霉素（Kan），酵母提取物，蛋白胨， 氯化钠，摇床，超净工作台，试管，恒温培养箱、恒温摇床、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、台式 高速离心机、台式小型振荡器、EP 管(1.5mL 微量离心管)、加样器(20uL～lmL)、吸头。 （四）实验的要点与教学建议 掌握农杆菌培养方法及提取质粒 DNA 的方法。 实验六、目的基因的 PCR 扩增 （一）实验目的 掌握 PCR 的基本原理、PCR 反应体系的配制和 PCR 反应程序的设置。 （二）实验内容 （1）配制 PCR 反应液；（2）设置 PCR 反应体系进行 PCR 反应；（3）琼脂糖凝胶电泳。 （三）实验仪器与材料 微量移液器、台式高速离心机、PCR 仪、电泳仪、电泳槽、紫外检测仪。 （四）实验的要点与教学建议 掌握 PCR 反应体系的配制和 PCR 反应程序的设置方法。 实验七、限制性内切酶酶切目的基因 （一）实验目的 学习和掌握进行 DNA 酶切的方法与操作技术