一 . 实验目的及背景 高等动物,高等植物的基因组相当宠大, 如人类细胞基因组由30 亿个碱基对组成,果蝇基因组有1.4×108个碱基对,水稻 基因组有1.4×109个碱基对。真核细胞基因组中,约1万 -1.5万个可表达的结构基因,其它大量存在的是调控序列和 内含子序列。可以说某特定物种的基因组,包含了该物种生长, 发育,繁殖等各项生理活动的几乎全部信息量,因而对真核细胞 基因组的结构,组成,以及表达调控的研究是至关重要的,而研 究的起点就是要获得纯度高--不含蛋白质、糖类、酚、氯仿等 污染;得率好--以便有足够量用于分析;基因组相对完整-- 断裂的基因组以便用于以后PCR分析,RFLP分析,基因文库的 构建,基因探测等的研究。 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破 细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化 出DNA,由于真核细胞基因组较大,在操作中应注意动作轻柔, 且在低温下进行,以最大限度地减少机械和化学作用对DNA的 剪切,从而获得相对完整的DNA。一 . 实验目的及背景 高等动物,高等植物的基因组相当宠大, 如人类细胞基因组由30 亿个碱基对组成,果蝇基因组有1.4×108个碱基对,水稻 基因组有1.4×109个碱基对。真核细胞基因组中,约1万 -1.5万个可表达的结构基因,其它大量存在的是调控序列和 内含子序列。可以说某特定物种的基因组,包含了该物种生长, 发育,繁殖等各项生理活动的几乎全部信息量,因而对真核细胞 基因组的结构,组成,以及表达调控的研究是至关重要的,而研 究的起点就是要获得纯度高--不含蛋白质、糖类、酚、氯仿等 污染;得率好--以便有足够量用于分析;基因组相对完整-- 断裂的基因组以便用于以后PCR分析,RFLP分析,基因文库的 构建,基因探测等的研究。 真核细胞基因组在提取过程中一般有以下几步,首先是机械法破 细胞抽提;然后去除蛋白质,糖类等细胞内杂质污染;最后纯化 出DNA,由于真核细胞基因组较大,在操作中应注意动作轻柔, 且在低温下进行,以最大限度地减少机械和化学作用对DNA的 剪切,从而获得相对完整的DNA