2-7原生质体分离过程:一步法 (以烟草叶片为例) 第一步:预处理即对烟草植株限制供水 第二步:取幼叶常规表面消毒后在无菌条件下 剥去外表皮切成4cm的小块 第三步:制作混合酶液(纤维素酶2%和果胶 酶0.5%)并加入的0.7mol甘露醇0.1mmol Cacl2 PH5.6 第四步:将小块烟叶放入混合酶液25℃处理 8~10小时 ·第五步:过滤、离心、洗涤(0.7mo甘露醇 液含01 m mol caci2)。如此2-3次、得原生 质体2-7 原生质体分离过程：一步法 （以烟草叶片为例） • 第一步：预处理即对烟草植株限制供水 • 第二步：取幼叶常规表面消毒后在无菌条件下 剥去外表皮切成4cm的小块 • 第三步：制作混合酶液（纤维素酶2%和果胶 酶0.5 % ）并加入的0.7 mol甘露醇0.1 m mol CaCl2. PH5.6 • 第四步：将小块烟叶放入混合酶液25 ℃处理 8~10小时 • 第五步：过滤、离心、洗涤（ 0.7 mol甘露醇 液含0.1 m mol CaCl2 ）。如此2~3次、得原生 质体