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4.其它的器材与试剂同实验四 三.实验方法 1.琼脂板的铺制 如实验四铺好琼脂板,然后按图3的图样打孔划槽,电泳时不要把槽中的琼脂挑岀来(槽 的二竖边先不划开) 图3 Ab 溴酚兰+BSA 2.加样 使琼脂板的上孔里充满抗原溶液,下孔里充满着指示蛋白。 3.电泳 如实验四的操作方法,调电流强度为2~4mAcm。当指示蛋白质到达滤纸的边缘时就可 以停止电泳。一般需要40~60分钟。 4.扩散 电泳结束后,从琼脂板中间的槽里用牙签挑出琼脂凝胶,并加入免疫血清。将琼脂板置 温盒内(或培养皿中),盖好盖子放置一夜。次日可以观察到凝胶内出现的沉淀线。一般情 况下每一沉淀线即代表一种抗原成分。根据沉淀的数量位置可以判断抗原的纯度以及抗原 蛋白质的种类。微量免疫电泳常用于分析样品的血清成分 5.观察 免疫电泳的图谱可以直接观察到抗原抗体沉淀线,也可以用0.1%的氨基黑染色后观察。 如果需要保存了的话可以拍照。273 4. 其它的器材与试剂同实验四 三. 实验方法 1. 琼脂板的铺制 如实验四铺好琼脂板,然后按图 3 的图样打孔划槽,电泳时不要把槽中的琼脂挑出来(槽 的二竖边先不划开)。 2. 加样 使琼脂板的上孔里充满抗原溶液,下孔里充满着指示蛋白。 3. 电泳 如实验四的操作方法,调电流强度为 2~4mA/cm。当指示蛋白质到达滤纸的边缘时就可 以停止电泳。一般需要 40~60 分钟。 4. 扩散 电泳结束后,从琼脂板中间的槽里用牙签挑出琼脂凝胶,并加入免疫血清。将琼脂板置 温盒内(或培养皿中),盖好盖子放置一夜。次日可以观察到凝胶内出现的沉淀线。一般情 况下每一沉淀线即代表一种抗原成分。根据沉淀的数量.位置可以判断抗原的纯度以及抗原 蛋白质的种类。微量免疫电泳常用于分析样品的血清成分。 5. 观察 免疫电泳的图谱可以直接观察到抗原抗体沉淀线,也可以用 0.1%的氨基黑染色后观察。 如果需要保存了的话可以拍照
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