3.不对称因子“T” 用于形容色谱峰拖尾和前伸的程度,多数为拖尾峰 h 进样 进样 1/1Oh 拖尾 前伸 A、B如上图所示 A 通常Tr=1.2~1.3,若T>2则峰不合格 峰拖尾的原因是硅胶基质上的Si一OH羟基未被全部键合而与溶质发生反应。 改进拖尾要用封尾技术:即用小分子的含甲基的物质再次对硅胶进行键合,封闭硅羟 基;还可在流动相中加入带-NH2氨基(对羟基敏感)的物质,将残余的羟基掩闭。 分辨率: R=2n2-) 4.分高度K1和K3 HPLC的目的和要求是:峰要尽可能窄(W1小),峰的间距尽可能大(tg相差大)。 (1)基线分离度K tua -t 基线分离时用K1。 H (2)峰高分离度: H-h K3 K3=1基线分离,K3更反映了实际分离心度。 145145 3. 不对称因子“Tf”： 用于形容色谱峰拖尾和前伸的程度，多数为拖尾峰。 h 进样 进样 A B 1/10h 拖尾 前伸 A B Tf ＝ A、B 如上图所示 通常 Tf＝1.2～1.3 ，若 Tf＞2 则峰不合格。 峰拖尾的原因是硅胶基质上的 Si－OH 羟基未被全部键合而与溶质发生反应。 改进拖尾要用封尾技术：即用小分子的含甲基的物质再次对硅胶进行键合，封闭硅羟 基；还可在流动相中加入带 –NH2 氨基(对羟基敏感)的物质，将残余的羟基掩闭。 分辨率： tR(1) tR(2) 1 2 2 1 2( ) W W R R S t t t t R ＋ － ＝ 进样 W1/2(1) W1/2(2) tW1 tW2 4. 分离度 K1 和 K3 HPLC 的目的和要求是：峰要尽可能窄（W1/2 小），峰的间距尽可能大（tR相差大）。 ⑴基线分离度 K1 ： 1/ 2(2) 1/ 2(1) (2) (1) 1 W W t t K R R － － ＝ 基线分离时用 K1。 H ⑵峰高分离度： h H H h K － 3 ＝ K3＝1 基线分离，K3 更反映了实际分离心度