富,子宫上皮、子宫腺及肌层AKP阳性反应。老龄小鼠睾丸大部分曲细精管萎缩,生精细 胞退化,精子消失,还精煎组睾丸大多数较正常 2)腺嘌呤诱发成年雄性大鼠肾损害模型睾丸结构的变化。 模型组睾丸萎缩,曲细精管退化变性,生殖上皮变薄,变性,结缔组织增多,间质细 胞减少,3β-HSD反应明显减弱。右归丸组的睾丸退化程度与数量较模型组轻,间质细胞 数量较多,3β-HSD反应有改善。模型组睾酮显著下降,右归丸组则较模型组显著上升 3)LRH-A诱发幼龄大鼠生殖紊乱模型的变化 模型组阴道涂片周期紊乱,周期长,动情期极短,甚至不出现。卵巢皮质内卵泡数量 减少,而黄体数量增加,但体积明显缩小,黄体细胞质内有空泡出现,黄体的平均面积、周 长和最大直径与正常组比较均有显著差异。卵巢的G6PDH和3β-HSD反应均增强。20α HSD阳性反应的黄体百分率也升高。模型组子宫缩小,卵巢、子宫的重量显著减轻,子宫 颈的切面面积显著变小,子宫腺体小,子宫颈部上皮细胞膨大,嗜酸性增强,电镜观察内膜 腺上皮微绒毛变短、数量减少,内质网扩张和线粒体轻度肿胀。模型组垂体前叶的促性腺激 素细胞数量、体积、着染程度和超微结构均无明显的改变。中药组的阴道涂片动情周期较模 型组的略有规律。卵巢黄体的数量少于模型组。卵巢的G6PDH与3β-HSD反应与模型组相 似,20αHSD阳性反应的黄体百分率比模型组下降。黄体的平均面积、周长和最大直径没 有显著性差异。子宫的重量和切面积比模型组增加。子宫内膜上皮细胞的变化没有模型组的 明显,腺上皮细胞的微绒毛的数量和长度均比模型组多和长。垂体前叶的促性腺激素细胞内 的颗粒对阿利新蓝着色反应有的减弱或甚至消失,因而细胞内的颗粒主要呈现PAS阳性反 综上所述,老龄大、小鼠,腺嘌呤与LRH-A雌、雄模型动物生殖系统发生的组织学、 组织化学与超微结构的变化均为生殖功能紊乱、降低所致,是肾精虚衰的表现,实质是下丘 脑一垂体一肾上腺、性腺轴的功能低下。填精补肾中药对于该轴功能低下具有多层次、多器 官、多环节的调节、保护作用,并证明“肾主生殖”与该轴有密切的内在联系 3.肾主骨、生髓理论的研究 肾主骨生髓”的生理功能,是肾中精气具有促进机体生长发育功能的表现。骨的生 长发育,有赖于骨髓的充盈及其所提供的营养。《素问.阴阳应象大论》说:“肾主骨 髓”:《素问六节脏象论》说肾“其充在骨”,都是说肾中精气充盈,才能充养骨髓,故 《素问.四时刺逆从论》说“肾主身之骨髓” 髓,有骨髓、脊髓和脑髓之分,这三者均属于肾中精气所化生。因此,肾中精气的盛 衰,也影响及脊髓和脑髓的充盈发育 )大鼠前脑基底核的研究。 应用电刺激损伤大鼠前脑基底核制作“类痴呆”模型,以乙酰胆碱酯酶(Ache)方法观察 苍白球大神经原的反应强度,结果证明模型组基底核的核团面积缩小,神经原数量、突起、 分枝数量显著减少,Ache活性反应显著降低;调理心肾中药使核团面积、神经原数量、突 起、分枝数量与Ache反应强度均得到增加与改善,表明调理心肾中药对大脑基底核大细胞 的Ache活性具有调节作用。胆碱能递质系统对纹状体神经元起易化作用,可促进学习和记 忆,因此调理心肾中药对老年性痴呆可能有较好的治疗作用 2)下丘脑的研究。 氢考大鼠下丘脑视上核及旁室甲细胞分泌颗粒及百分比减少,乙细胞百分比上升。补 肾中药组视上核、旁室核的甲细胞、乙细胞的百分比接近正常。提示补肾中药对视上核、旁 室核的神经分泌有一定的调整作用 3)免疫系统的研究 (1)脾脏淋巴细胞的变化:氢考小鼠脾脏及脾小体不同程地缩小,淋巴细胞显著减 少,电镜观察,注射氢考3天时,淋巴细胞核内异染色质减少,注射氢考5-10天核溶解消 失。应用补肾药治疗后,淋巴细胞数量较多,其超微结构基本正常。 (2)老年小鼠淋巴结与结肠落花生凝集素阳性细胞(PNAˉ细胞)有不同程度减少,服 用还精煎小鼠的淋巴结和降结肠内PNA+细胞数量有不同程度增加。 (3)老年组大鼠胸腺显著萎缩,只残留少量胸腺组织,其中淋巴细胞也显著减少,且 有大量浆细胞和巨噬细胞, Feulgen(DNA反应)反应减弱。固真组与葆贞组胸腺亦萎缩 但残留的胸腺组织较多,其中淋巴细胞也较多, Feulgen反应增强。富，子宫上皮、子宫腺及肌层 AKP 阳性反应。老龄小鼠睾丸大部分曲细精管萎缩，生精细 胞退化，精子消失，还精煎组睾丸大多数较正常。 2）腺嘌呤诱发成年雄性大鼠肾损害模型睾丸结构的变化。 模型组睾丸萎缩，曲细精管退化变性，生殖上皮变薄，变性，结缔组织增多，间质细 胞减少，3β-HSD 反应明显减弱。右归丸组的睾丸退化程度与数量较模型组轻，间质细胞 数量较多，3β-HSD 反应有改善。模型组睾酮显著下降，右归丸组则较模型组显著上升。 3）LRH-A 诱发幼龄大鼠生殖紊乱模型的变化。 模型组阴道涂片周期紊乱，周期长，动情期极短，甚至不出现。卵巢皮质内卵泡数量 减少，而黄体数量增加，但体积明显缩小，黄体细胞质内有空泡出现，黄体的平均面积、周 长和最大直径与正常组比较均有显著差异。卵巢的 G6PDH 和 3β-HSD 反应均增强。20α- HSD 阳性反应的黄体百分率也升高。模型组子宫缩小，卵巢、子宫的重量显著减轻，子宫 颈的切面面积显著变小，子宫腺体小，子宫颈部上皮细胞膨大，嗜酸性增强，电镜观察内膜 腺上皮微绒毛变短、数量减少，内质网扩张和线粒体轻度肿胀。模型组垂体前叶的促性腺激 素细胞数量、体积、着染程度和超微结构均无明显的改变。中药组的阴道涂片动情周期较模 型组的略有规律。卵巢黄体的数量少于模型组。卵巢的 G6PDH 与 3β-HSD 反应与模型组相 似，20αHSD 阳性反应的黄体百分率比模型组下降。黄体的平均面积、周长和最大直径没 有显著性差异。子宫的重量和切面积比模型组增加。子宫内膜上皮细胞的变化没有模型组的 明显，腺上皮细胞的微绒毛的数量和长度均比模型组多和长。垂体前叶的促性腺激素细胞内 的颗粒对阿利新蓝着色反应有的减弱或甚至消失，因而细胞内的颗粒主要呈现 PAS 阳性反 应。 综上所述，老龄大、小鼠，腺嘌呤与 LRH-A 雌、雄模型动物生殖系统发生的组织学、 组织化学与超微结构的变化均为生殖功能紊乱、降低所致，是肾精虚衰的表现，实质是下丘 脑—垂体—肾上腺、性腺轴的功能低下。填精补肾中药对于该轴功能低下具有多层次、多器 官、多环节的调节、保护作用，并证明“肾主生殖”与该轴有密切的内在联系。 3．肾主骨、生髓理论的研究 “肾主骨生髓”的生理功能，是肾中精气具有促进机体生长发育功能的表现。骨的生 长发育，有赖于骨髓的充盈及其所提供的营养。《素问.阴阳应象大论》说：“肾主骨 髓”；《素问.六节脏象论》说肾“其充在骨”，都是说肾中精气充盈，才能充养骨髓，故 《素问.四时刺逆从论》说“肾主身之骨髓”。 髓，有骨髓、脊髓和脑髓之分，这三者均属于肾中精气所化生。因此，肾中精气的盛 衰，也影响及脊髓和脑髓的充盈发育。 1）大鼠前脑基底核的研究。 应用电刺激损伤大鼠前脑基底核制作“类痴呆”模型，以乙酰胆碱酯酶(Ache)方法观察 苍白球大神经原的反应强度，结果证明模型组基底核的核团面积缩小，神经原数量、突起、 分枝数量显著减少， Ache 活性反应显著降低；调理心肾中药使核团面积、神经原数量、突 起、分枝数量与 Ache 反应强度均得到增加与改善，表明调理心肾中药对大脑基底核大细胞 的 Ache 活性具有调节作用。胆碱能递质系统对纹状体神经元起易化作用，可促进学习和记 忆，因此调理心肾中药对老年性痴呆可能有较好的治疗作用。 2）下丘脑的研究。 氢考大鼠下丘脑视上核及旁室甲细胞分泌颗粒及百分比减少，乙细胞百分比上升。补 肾中药组视上核、旁室核的甲细胞、乙细胞的百分比接近正常。提示补肾中药对视上核、旁 室核的神经分泌有一定的调整作用。 3）免疫系统的研究。 （1）脾脏淋巴细胞的变化：氢考小鼠脾脏及脾小体不同程地缩小，淋巴细胞显著减 少，电镜观察，注射氢考 3 天时，淋巴细胞核内异染色质减少，注射氢考 5-10 天核溶解消 失。应用补肾药治疗后，淋巴细胞数量较多，其超微结构基本正常。 （2）老年小鼠淋巴结与结肠落花生凝集素阳性细胞（PNA+细胞）有不同程度减少，服 用还精煎小鼠的淋巴结和降结肠内 PNA+细胞数量有不同程度增加。 （3）老年组大鼠胸腺显著萎缩，只残留少量胸腺组织，其中淋巴细胞也显著减少，且 有大量浆细胞和巨噬细胞，Feulgen（DNA 反应）反应减弱。固真组与葆贞组胸腺亦萎缩， 但残留的胸腺组织较多，其中淋巴细胞也较多，Feulgen 反应增强