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二、稳定转染细胞 稳定转染细胞是一种最常用的细胞水平的转基因模 型,外源基因通过转基因过程插入到细胞染色体中,使 外源基因可以作为细胞染色体的一部分得以在细胞中稳 定表达。 稳定转染细胞基本过程:1、真核重组表达质粒的构 建:将外源基因和真核表达质粒连接构建成重组质粒;2、 在原核细胞中复制扩增和克隆化真核重组表达质粒;3、 将重组表达质粒转染哺乳动物细胞;4、重组质粒转染细 胞的克隆化筛选、保存;5、转染细胞表达目的蛋白、提 取、鉴定。二、稳定转染细胞 稳定转染细胞是一种最常用的细胞水平的转基因模 型,外源基因通过转基因过程插入到细胞染色体中,使 外源基因可以作为细胞染色体的一部分得以在细胞中稳 定表达。 稳定转染细胞基本过程:1、真核重组表达质粒的构 建:将外源基因和真核表达质粒连接构建成重组质粒;2、 在原核细胞中复制扩增和克隆化真核重组表达质粒;3、 将重组表达质粒转染哺乳动物细胞;4、重组质粒转染细 胞的克隆化筛选、保存;5、转染细胞表达目的蛋白、提 取、鉴定
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