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江苏食晶些蠱馳工覆系鲁佩笔记 议扮 电泳 electrophoresis 概述 电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋 白质溶液的p在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在 电场中向负极移动。只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动 电泳现象早在1890年就被发现,1907年有人曾在琼脂中电泳,研究白喉毒素;1937年由 Tiselius制 成界面电泳仪,并开始用于蛋白质的研究。从此,人们才逐渐认识到电泳技术对于生物科学研究是一种重 要工具。然而,界面电泳结构复杂。价格昂贵难于普及。1940年左右。以纸为支持物的电泳问世后,电泳 技术得到迅速发展 电泳技术以支持物分,可分为纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳,琼脂(糖)凝胶电泳及 聚丙烯酰胺凝胶电泳等。经凝胶形状分有水平平板电泳,园盘柱状电泳及垂直平板电泳。各种类型的电泳 技术概括如表 类别 名称 用支持体的电泳技术 1.纸上电泳 2.醋酸纤维薄膜电泳 3.薄层电泳 4.非凝胶性支持体区带电泳(支持体有:淀粉,纤维素粉,玻璃粉, 硅胶等) 5.凝胶支持体区带电泳①淀粉液②聚丙烯酰胺凝胶③琼脂(糖)凝 不用支持体的电泳技术1. Tiselius或微量电泳 2.显微电泳 3.等电点聚焦电泳技术 4.等速电泳技术 5.密度梯度电泳 各类电泳技术已经广泛地用于基础理论研究,临床诊断及工业制造等方面。例如用醋酸纤维薄膜电泳分 析血清蛋白:用琼脂对流免疫电泳分析病人血清,为早期诊断原发性肝癌提供资料:用高压电泳分离肽段, 研究蛋白质一级结构:用高压电泳和层析结合研究核酸的一级结构。凝胶电泳技术在分离分析酶。蛋白质, 核酸等生物大分子方面具有较高的分辩力,为生物化学,分子生物学的发展作出了重大贡献。 影响电泳的因素 不同的带电颗粒在同一电场中泳动的速度不同。常用泳动度(或迁移率)来表示。泳动度是指带电颗 粒在单位电场强度下泳的速度。影响泳动度的主要因素有: 1、首先决定于带颗粒的性质,即颗粒所带净电荷的数量,大小及形状。 般说来,颗粒带净电荷多,直径小而接近于球形,则在电场中泳动速度快,反之则慢。泳动度还与 分子的形状,介质粘度,颗粒所带电荷有关,泳动度与颗表面电荷成正比,与介质粘度及颗粒半径反比。江苏食品学院生物工程系备课笔记 仪器分析 10 电泳 electrophoresis 概 述 电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋 白质溶液的 pH 在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在 电场中向负极移动。只有蛋白质溶液 pH 在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。 电泳现象早在 1890 年就被发现,1907 年有人曾在琼脂中电泳,研究白喉毒素;1937 年由 Tiselius 制 成界面电泳仪,并开始用于蛋白质的研究。从此,人们才逐渐认 识到电泳技术对于生物科学研究是一种重 要工具。然而,界面电泳结构复杂。价格昂贵难于普及。1940 年左右。以纸为支持物的电泳问世后,电泳 技术得到迅速发展。 电泳技术以支持物分,可分为纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳,淀粉凝胶电泳,琼 脂(糖)凝胶电泳及 聚丙烯酰胺凝胶电泳等。经凝胶形状分有水平平板电泳,园盘柱 状电泳及垂直平板电泳。各种类型的电泳 技术概括如表。 类 别 名 称 用支持体的电泳技术 1.纸上电泳 2.醋酸纤维薄膜电泳 3.薄层电泳 4.非凝胶性支持体区带电泳 (支持体有:淀粉,纤维素粉,玻璃粉, 硅胶等) 5.凝胶支持体区带电泳 ①淀粉液 ②聚丙烯酰胺凝胶 ③琼脂(糖)凝 胶 不用支持体的电泳技术 1.Tiselius 或微量电泳 2.显微电泳 3.等电点聚焦电泳技术 4.等速电泳技术 5.密度梯度电泳 各类电泳技术已经广泛地用于基础理论研究,临床诊断及工业制造等方面。例如用醋酸纤维薄膜电泳分 析血清蛋白;用琼脂对流免疫电泳分析病人血清,为早期诊断原发性肝癌提供资料;用高压电泳分离肽段, 研究蛋白质一级结构;用高压电泳和层析结 合研究核酸的一级结构。凝胶电泳技术在分离分析酶。蛋白质, 核酸等生物大分子方 面具有较高的分辩力,为生物化学,分子生物学的发展作出了重大贡献。 影响电泳的因素 不同的带电颗粒在同一电场中泳动的速度不同。常用泳动度(或迁移率)来表 示。泳动度是指带电颗 粒在单位电场强度下泳的速度。影响泳动度的主要因素有: 1、首先决定于带颗粒的性质,即颗粒所带净电荷的数量,大小及形状。 一般说来,颗粒带净电荷多,直径小而接近于球形,则在电场中泳动速度快,反 之则慢。泳动度还与 分子的形状,介质粘度,颗粒所带电荷有关,泳动度与颗表面电 荷成正比,与介质粘度及颗粒半径反比
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