本科分子生物学试卷（三） 第 3 页 共 3 页 1. 激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？(12 分) 答案要点：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白 CRP（cAMP receptor protein），cAMP 与 CRP 结合后所形成的复合 物称激活蛋白 CAP（cAMPactivated protein ）。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时，CAP 合成量 增加，CAP 具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。一些依赖于 CRP 的启动子缺乏一般启动子所具有的典型 的-35 区序列特征（TTGACA）。因此 RNA 聚合酶难以与其结合。 CAP 的存在（功能）：能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现以下二方面： ①CAP 通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10 区结合，起到取代-35 区功能的作用。 ②CAP 还能抑制 RNA 聚合酶与 DNA 中其它位点的结合，从而提高与其特定启动子结合的概率。 2. 典型的 DNA 重组实验通常包括哪些步骤？(12 分) 答案要点：a、提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一 DNA 分子上（克隆载体），形 成一个新的重组 DNA 分子。 b、将这个重组 DNA 分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 c、对那些吸收了重组 DNA 的受体细胞进行筛选和鉴定。 d、对含有重组 DNA 的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 3. 分别说出 5 种以上 RNA 的功能？ (11 分) 答案要点： 转运 RNA tRNA 转运氨基酸 核蛋白体 RNA rRNA 核蛋白体组成成 信使 RNA mRNA 蛋白质合成模板 不均一核 RNA hnRNA 成熟 mRNA 的前体 小核 RNA snRNA 参与 hnRNA 的剪接 小胞浆 RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分 反义 RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用 核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的 RNA 4. 对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？ (11 分) 答案要点：天然质粒往往存在着缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建： a、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择,通常是抗生素基因。 b、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。 c、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。 d、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。本科分子生物学试卷（三） 第 3 页 共 3 页 1. 激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？(12 分) 答案要点：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白 CRP（cAMP receptor protein），cAMP 与 CRP 结合后所形成的复合 物称激活蛋白 CAP（cAMPactivated protein ）。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时，CAP 合成量 增加，CAP 具有激活乳糖（Lac）等启动子的功能。一些依赖于 CRP 的启动子缺乏一般启动子所具有的典型 的-35 区序列特征（TTGACA）。因此 RNA 聚合酶难以与其结合。 CAP 的存在（功能）：能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现以下二方面： ①CAP 通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10 区结合，起到取代-35 区功能的作用。 ②CAP 还能抑制 RNA 聚合酶与 DNA 中其它位点的结合，从而提高与其特定启动子结合的概率。 2. 典型的 DNA 重组实验通常包括哪些步骤？(12 分) 答案要点：a、提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一 DNA 分子上（克隆载体），形 成一个新的重组 DNA 分子。 b、将这个重组 DNA 分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 c、对那些吸收了重组 DNA 的受体细胞进行筛选和鉴定。 d、对含有重组 DNA 的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 3. 分别说出 5 种以上 RNA 的功能？ (11 分) 答案要点： 转运 RNA tRNA 转运氨基酸 核蛋白体 RNA rRNA 核蛋白体组成成 信使 RNA mRNA 蛋白质合成模板 不均一核 RNA hnRNA 成熟 mRNA 的前体 小核 RNA snRNA 参与 hnRNA 的剪接 小胞浆 RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分 反义 RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用 核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的 RNA 4. 对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？ (11 分) 答案要点：天然质粒往往存在着缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建： a、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择,通常是抗生素基因。 b、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。 c、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。 d、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝