5。识别相同序列的限制酶称()同裂南 6.有些限制酶只切割双链DNA中的一条链，产生单链缺口，即()切口酶 7,个体间DNA限制性片段长度的差异叫()限制性片段长度多态性(RFLP) 8.DNA载体经Hind切割后产生粘性末端，能发生载体自连，影响载体与外 源DNA的连接效率，常用的防止载体自连的方法有()、()。去磷酸化：部分补平 9.完全的回文序列应具备的特点即()和()。能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称 互补配对：两条互补链的3的序列组成相同，即将一条链旋转180°，则两条链重叠 10.Dcm Methylase(Dcm甲基化酶)的识别序列为()和()，该酶的作用位点为()。 CCTGG:CCAGG:第二个胞嘧啶C的C5位置 Il.分别写出以下限制性内切核酸酶(Restriction endonuclease)的识别序列EcoR I()、 Sau3AI()、Hind()。GAATIC:GATC:AAGCTT 12.限制性内切核酸酶(Restriction endonuclease)通常保存在()浓度的甘油溶液中。s0% 13.载体和外源DNA经酶切，在进行下一步操作前，需消除限制性内切核酸酶 (Restriction endonuclease)的影响。常用的方法有()、()、()、()。EDTA法： 加热法：苯酚抽提法：试剂盒除酶法 14.对DNA进行双爾切时，醇切缓冲液的选择原则有(1)()、(2)()、(3)() 可选用都合适的缓冲液或通用缓冲液：若缓冲液不可替代则先用低浓度的，再加适量NCI和第二种酶： 先用低盐缓冲液再用高盐缓冲液 15.Dnase I为内切核酸酶，在不同的辅因子条件下，产生不同的酶切效果，当Mg2+存 在时()当M2+存在时()。独立作用于每条DNA链，且切割位点随机：可在两条链 的大致同一位置切制dsDNA,产生平端或I到2个核甘酸突出的DNA片断 16.Klenow DNA聚合酵是E.coli DNA polymerase经蛋白酶裂解而从全中除去 ()活性的多肽大片断，而其他活性保持不变。53的外切活性 17.E.coli DNA连接酶与T4DNA连接酶相似，但需()的参与，且其平端连接效 率低常用于置换合成法。烟酰胺一腺攀吟二核苷酸(NAD十) 18.用于构建嵌套缺失体常用到的核酸酶有()、()、()。DnaseI:外切核酸酶Ⅲ：BAL31 19.琼脂糖酶作用于低熔点琼脂糖，它的活性是可切割琼脂糖酶亚单位。由于此酶可分解球 脂糖，因此应用于()。分离大片段DNA 三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。 1.限制性内切酶一般保存在()浓度的甘油溶液中。C50% A.10%B.20%C.50%D.60%5. 识别相同序列的限制酶称（） 同裂酶 6. 有些限制酶只切割双链 DNA 中的一条链，产生单链缺口，即（） 切口酶 7. 个体间 DNA 限制性片段长度的差异叫（） 限制性片段长度多态性（RFLP） 8. DNA 载体经 HindⅢ 切割后产生粘性末端，能发生载体自连，影响载体与外 源 DNA 的连接效率，常用的防止载体自连的方法有（）、（）。去磷酸化；部分补平 9. 完全的回文序列应具备的特点即（）和（）。能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称 互补配对；两条互补链的 5'-3' 的序列组成相同，即将一条链旋转 180°，则两条链重叠 10. Dcm Methylase（Dcm 甲基化酶）的识别序列为（）和（），该酶的作用位点为（）。 CCTGG；CCAGG；第二个胞嘧啶 C 的 C5 位置 11. 分别写出以下限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的识别序列 EcoRⅠ（）、 Sau3AⅠ（）、HindⅢ（）。GAATTC；GATC；AAGCTT 12. 限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）通常保存在（）浓度的甘油溶液中。50% 13. 载体和外源 DNA 经酶切，在进行下一步操作前，需消除限制性内切核酸酶 （Restriction endonuclease）的影响。常用的方法有（）、（）、（）、（）。EDTA 法； 加热法；苯酚抽提法；试剂盒除酶法 14. 对 DNA 进行双酶切时，酶切缓冲液的选择原则有(1) （）、(2) （）、(3) （） 可选用都合适的缓冲液或通用缓冲液；若缓冲液不可替代则先用低浓度的，再加适量 NaCl 和第二种酶； 先用低盐缓冲液再用高盐缓冲液 15. DnaseⅠ为内切核酸酶，在不同的辅因子条件下，产生不同的酶切效果，当 Mg2+ 存 在时（）；当 Mn2+ 存在时（）。独立作用于每条 DNA 链，且切割位点随机；可在两条链 的大致同一位置切割 dsDNA，产生平端或 1 到 2 个核甘酸突出的 DNA 片断 16. Klenow DNA 聚合酶是 E.coli DNA polymerase 经蛋白酶裂解而从全酶中除去 （）活性的多肽大片断，而其他活性保持不变。5'-3' 的外切活性 17. E.coli DNA 连接酶与 T4 DNA 连接酶相似，但需（）的参与，且其平端连接效 率低常用于置换合成法。烟酰胺－腺嘌呤二核苷酸（NAD＋） 18. 用于构建嵌套缺失体常用到的核酸酶有（）、（）、（）。DnaseⅠ；外切核酸酶Ⅲ；BAL31 19. 琼脂糖酶作用于低熔点琼脂糖，它的活性是可切割琼脂糖酶亚单位。由于此酶可分解琼 脂糖，因此应用于（）。分离大片段 DNA 三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。 1. 限制性内切酶一般保存在（）浓度的甘油溶液中。C 50% A. 10% B.20% C.50% D.60%