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【解析】(1)质粒作为基因进入受体细胞的载体的条件之一是要有标记基因,以便于重组 DNA分子的第洗。(2)同一种限制切别DNA分子产生的性末端相同图贝签鉴。(3)DNA 连接酶催化两个DNA片段形成磷酸二酯键:而通过DNA连接酶作用能将两个DNA分子片 段连接,表明经两种限制酶(BamH I和Bgl)切割得到的DNA片 段,其黏性 末端相同。(4)由 题意知:由于图三空圈相对应的大肠杆茵能在含氦苄青霉素的培养基上生长,而不能在含四斯 素的培养基上生长故可推知与图三空围抽对应的图二中的苗落能抗氛苄青驾素但不能抗四 环素。由图二、图三结果可知多数大肠杆茵都能抗气苄寺露去和四环素而经限制酶BmH 【作用后,标记基国T被破坏,故导入目的基国的大肠杆菌不能抗四环素,图三结果显示,多 数大肠杆菌号 入的是既能抗苄青霉素,又能抗四环素的pBR322质粒,而不 是重组质粒(重细 质粒的四环素抗性基因被切断)。 15.(1)能自我复制、具有特殊的标记基因(2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培 养基上均不生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或含有重组质粒)二 者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长四环素 【解析】)质粒作 ()受体细 为载体,应具备的基本 制酶切 割位点,供外 DNA片段(基国)入其中;在受体细胞中能自我复制,或能整合到染色体DNA上,随染色份 DNA进行同步复制;有特殊的标记基因,供重组DNA的鉴定和选择等。(2)在培养基中加入氯 苄青霉素选行筛选,其中未被转化的大肠杆茵和仅含环状目的基因的大肠杆茵,国不舍氨苄青 露素抗性基因而都不能在此培养基上存活二者不能区分。含有盾拉载体的大肠杆菌和会有 插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中都含有苄青素抗性基国,都能在此培养基上存 活,二者也不能区分 ,若要将含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌进 一步筛选出来 需要使用含有四环素的培养基。(3)某些蓝茵体经改造后作为裁体,导入受体细胞后,其DNA 复制所需的原料来自受体细胞。 学案设计(二) ■■■学习目标 1简述基因工程的概念及目的。 2.掌握基因工程操作的三种工具(限制酶,DNA连接酶,载体),及各工具的特点和用途 3锻炼自己动手制作模型的能力。 ■■■■自主预习 一、基因工程的概念 1.基因工程是指按照 ,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造 出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在_ 水平上进行设计 和施工的,因此又叫作 2.基因工程的操作水平 原理基因重组:优点:打破生殖隔离,定向改造生 物性状。 二、重组DNA技术的基本工具 一分子手术刀 一限制性内切核酸酶 1来源主要是从 分离纯化出来的。 2,功能能够识别双链DNA分 苷酸序列,并且使每一条链中 位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有特异性。大多数限制酶的识别序列由 个核苷酸组成。 3经限制酶切割产生的DNA片段末端一般有两种形式」 和 【解析】(1)质粒作为基因进入受体细胞的载体的条件之一是要有标记基因,以便于重组 DNA 分子的筛选。(2)同一种限制酶切割 DNA 分子产生的黏性末端相同,图见答案。(3)DNA 连接酶催化两个 DNA 片段形成磷酸二酯键;而通过 DNA 连接酶作用能将两个 DNA 分子片 段连接,表明经两种限制酶(BamHⅠ和 BglⅡ)切割得到的 DNA 片段,其黏性末端相同。(4)由 题意知:由于图三空圈相对应的大肠杆菌能在含氨苄青霉素的培养基上生长,而不能在含四环 素的培养基上生长,故可推知与图三空圈相对应的图二中的菌落能抗氨苄青霉素,但不能抗四 环素。由图二、图三结果可知,多数大肠杆菌都能抗氨苄青霉素和四环素,而经限制酶 BamH Ⅰ作用后,标记基因 Tetr被破坏,故导入目的基因的大肠杆菌不能抗四环素,图三结果显示,多 数大肠杆菌导入的是既能抗氨苄青霉素,又能抗四环素的 pBR322 质粒,而不是重组质粒(重组 质粒的四环素抗性基因被切断)。 15.(1)能自我复制、具有特殊的标记基因 (2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培 养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或含有重组质粒) 二 者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长 四环素 (3)受体细胞 【解析】(1)质粒作为载体,应具备的基本条件有:有一个至多个限制酶切割位点,供外源 DNA 片段(基因)插入其中;在受体细胞中能自我复制,或能整合到染色体 DNA 上,随染色体 DNA 进行同步复制;有特殊的标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择等。(2)在培养基中加入氨 苄青霉素进行筛选,其中未被转化的大肠杆菌和仅含环状目的基因的大肠杆菌,因不含氨苄青 霉素抗性基因而都不能在此培养基上存活,二者不能区分。含有质粒载体的大肠杆菌和含有 插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中都含有氨苄青霉素抗性基因,都能在此培养基上存 活,二者也不能区分。若要将含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌进一步筛选出来,还 需要使用含有四环素的培养基。(3)某些噬菌体经改造后作为载体,导入受体细胞后,其 DNA 复制所需的原料来自受体细胞。 学案设计(二) 学习目标 1.简述基因工程的概念及目的。 2.掌握基因工程操作的三种工具(限制酶,DNA 连接酶,载体),及各工具的特点和用途。 3.锻炼自己动手制作模型的能力。 自主预习 一、基因工程的概念 1.基因工程是指按照 ,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造 出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 水平上进行设计 和施工的,因此又叫作 。 2.基因工程的操作水平: ;原理:基因重组;优点:打破生殖隔离,定向改造生 物性状。 二、重组 DNA 技术的基本工具 (一)“分子手术刀”——限制性内切核酸酶 1.来源:主要是从 中分离纯化出来的。 2.功能:能够识别双链 DNA 分子的 核苷酸序列,并且使每一条链中 部 位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有特异性。大多数限制酶的识别序列由 个核苷酸组成。 3.经限制酶切割产生的 DNA 片段末端一般有两种形式: 和
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