得到的缓冲液加碱碱化,用有机溶剂萃取,回收溶剂,即得到不同碱度的生物碱。采用 p梯度法分离前,通常先用多缓冲纸色谱法对总碱中各生物碱的碱度强弱作初步了解,据 此调节pH值。 (2)利用生物碱或生物碱盐溶解度的差异进行分离 生物碱以及生物碱盐在不同溶液的溶解度可能存在明显的差异,可用于分离 如:氧化苦参碱是苦参碱的氮氧化物,极性稍大,不溶于乙醚。而苦参碱溶于乙醚,于 两者的氯仿液中加入乙醚,氧化苦参碱即可析出 如:麻黄碱草酸盐在水中的溶解度比伪麻黄碱草酸盐的溶解度小,可以自水溶液中先行 析出 (3)利用生物碱特殊功能基不同进行分离 有无酚羟基一一利用酚羟基可溶于NaOH溶液,用NaOH溶液处理与无酚羟 基者分离。 例如{有无内酯或内酰胺结构一一利用内酯、内酰胺在苛性碱溶液中加热可开环 生成溶于水的羧酸盐,与无内酯、内酰胺结构 的生物碱分离。 制备功能基衍生物一一利用仲胺可与亚硝酸生成亚硝基衍生物,或与氯乙 酰或氯甲酸乙酯生成相应的酯等,与叔胺分离。 (4)利用色谱法进行分离 利用色谱法可以得到生物碱单体纯品 吸附色谱法 氧化铝 多用反相色谱法 吸附剂了硅胶 分配色谱法 纤维素 吸附色谱法可用苯、氯仿、乙醚等有机溶剂 洗脱剂 分配色谱法可用缓冲液饱和的有机液。 (5)水溶性生物碱的提取分离 水溶性生物碱如用亲脂性有机溶剂提取法提不岀,仍留在原料中;如用水或酸水提取法 以及醇类提取法可被提出,但进一步处理后则留在碱水中,将其从碱水中分出,可用以下方 法处理。 ①沉淀法 将碱水液用酸调p弱酸性,加生物碱的沉淀试剂,使水溶性生物碱与试剂生成不溶于 水的复合物或盐而析出,滤取沉淀,净化、分解即得水溶性生物碱。实验室常用的雷氏铵盐 沉淀法,具体操作是将碱水液加盐酸调至p2左右,加λ新鲜配制的雷氏铵盐饱和水溶液, 滤集生成的生物碱雷氏盐沉淀,用少量水洗涤1~2次,抽干。将沉淀溶于丙酮(或乙醇), 滤除不溶物,再将此丙酮液通过氧化铝柱净化,并用丙酮洗脱,收集丙酮洗脱液,向其中加 入硫酸银饱和水溶液。也可不经过氧化铝柱浄化直接向生物碱雷氏盐丙酮溶液中加入硫酸饱 和水溶液,使生物碱雷氏盐分解,生成生物碱硫酸盐和雷氏银盐沉淀,过滤后再向滤液中加 入计算量氯化钡溶液,生成生物碱盐酸盐和硫酸钡沉淀,过滤,滤液蒸干即得水溶性生物碱 盐酸盐,整个反应过程以反应式表示如下 B+ NH, [Cr(SCN),(NH3)2-B[Cr(SCN), (NH3),]i NHa 2B [Cr(SCN).(NH3)2]+ Ag2SO ←2Ag[Cr(SCN)4(NH3)2]↓+BsS0 B2SOA+ BaClz 2BC1+ BaSO B=季铵生物碱阳离子 也可将生物碱雷氏盐丙酮液通过氯离子型阴离子交换树脂柱,直接得到生物碱的盐酸得到的缓冲液加碱碱化，用有机溶剂萃取，回收溶剂，即得到不同碱度的生物碱。采用 pH 梯度法分离前，通常先用多缓冲纸色谱法对总碱中各生物碱的碱度强弱作初步了解，据 此调节 pH 值。 （2）利用生物碱或生物碱盐溶解度的差异进行分离 生物碱以及生物碱盐在不同溶液的溶解度可能存在明显的差异，可用于分离。 如：氧化苦参碱是苦参碱的氮氧化物，极性稍大，不溶于乙醚。而苦参碱溶于乙醚，于 两者的氯仿液中加入乙醚，氧化苦参碱即可析出。 如：麻黄碱草酸盐在水中的溶解度比伪麻黄碱草酸盐的溶解度小，可以自水溶液中先行 析出。 （3）利用生物碱特殊功能基不同进行分离 例如 有无酚羟基——利用酚羟基可溶于 NaOH 溶液，用 NaOH 溶液处理与无酚羟 基者分离。 有无内酯或内酰胺结构——利用内酯、内酰胺在苛性碱溶液中加热可开环 生成溶于水的羧酸盐，与无内酯、内酰胺结构 的生物碱分离。 制备功能基衍生物——利用仲胺可与亚硝酸生成亚硝基衍生物，或与氯乙 酰或氯甲酸乙酯生成相应的酯等，与叔胺分离。 （4） 利用色谱法进行分离 利用色谱法可以得到生物碱单体纯品。 吸附色谱法 氧化铝 多用 反相色谱法 吸附剂 硅胶 分配色谱法 纤维素 吸附色谱法可用苯、氯仿、乙醚等有机溶剂。 洗脱剂 分配色谱法可用缓冲液饱和的有机液。 （5）水溶性生物碱的提取分离 水溶性生物碱如用亲脂性有机溶剂提取法提不出，仍留在原料中；如用水或酸水提取法 以及醇类提取法可被提出，但进一步处理后则留在碱水中，将其从碱水中分出，可用以下方 法处理。 ○1 沉淀法 将碱水液用酸调 pH 弱酸性，加生物碱的沉淀试剂，使水溶性生物碱与试剂生成不溶于 水的复合物或盐而析出，滤取沉淀，净化、分解即得水溶性生物碱。实验室常用的雷氏铵盐 沉淀法，具体操作是将碱水液加盐酸调至 pH 2 左右，加入新鲜配制的雷氏铵盐饱和水溶液， 滤集生成的生物碱雷氏盐沉淀，用少量水洗涤 1～2 次，抽干。将沉淀溶于丙酮（或乙醇）， 滤除不溶物，再将此丙酮液通过氧化铝柱净化，并用丙酮洗脱，收集丙酮洗脱液，向其中加 入硫酸银饱和水溶液。也可不经过氧化铝柱净化直接向生物碱雷氏盐丙酮溶液中加入硫酸饱 和水溶液，使生物碱雷氏盐分解，生成生物碱硫酸盐和雷氏银盐沉淀，过滤后再向滤液中加 入计算量氯化钡溶液，生成生物碱盐酸盐和硫酸钡沉淀，过滤，滤液蒸干即得水溶性生物碱 盐酸盐，整个反应过程以反应式表示如下。 B + ＋ NH4[Cr(SCN)4(NH3)2] B[Cr(SCN)4(NH3)2]↓ ＋ NH4 + 2B[Cr(SCN)4(NH3)2] ＋ Ag2SO4 2Ag[Cr(SCN)4(NH3)2]↓＋B2SO4 B2SO4 ＋ BaCl2 2BCl ＋ BaSO4↓ B +＝季铵生物碱阳离子 也可将生物碱雷氏盐丙酮液通过氯离子型阴离子交换树脂柱，直接得到生物碱的盐酸