自1946年开始培育无动物，1959年宫川用不锈的主体都分。并附有小的玻璃观聚密和灵敏的机城手，使不锈钢离器达到比较完 善的地步。但这种隔离器既笨重适价又昂贵，不可能大量推广使用，因而也限制了无萄动物工作的开展。在日本现有24个单位从事无菌动物而 究工作，仅在东京就有9个无菌动物研究单位。50年代，发明了用过氧乙酸进行表面灭菌的方法以后，1957年PC.T©xer在美国印第安那州圣 母大学.b研究室里创造了料膜隔离器，用无毒聚氧乙烯满膜制造隔离器的主体部分。由于这类隔离器制作方便，联轻伊又实用，所需用 费用又不高，仅为不锈钢隔离器的几十分之一 灭菌方法也大为简便，因此日新广泛地得到应用，促进了无菌动物研究的发展。 I978年Lobund研究室的Morris Pollard博士来华讲学时给我国赠送了一具Trexler隔离圈，中国医科院动物中心已仿制成功，上海、苏州 等地也已制作成功，并已小批量生产，近二年来，T®xr教授亲自来华讲学，传授隔离器和无菌动物饲养繁殖技术，促进了我国无菌动物研究 的发展。现在北京 上海等地已有几个单位在研究无菌动物。 此外，澳大利亚、比利时、西德、苏联。捷克.、英国、法国、意大利等国和地区，都已建立了包活无菌动物在内的实验动物中心， 对无菌动物的研究最初只是为了探时高等动物与体内微生物之间的关系。19世纪末，Nattal氏及Thierfelder氏用制腹术取出了妊振琢鼠的胎 儿，在无茵环境下饲养了10天，随后，Schettelus发现鸡的还胎是无菌的，后来成功地进行了维鸡的无菌化.无菌动物所只有的独特优越性使 其成为一种新型的实验动物。随着生物学的进步和技术的发展，试行了各种动物的无菌化，现在无菌动物的品种已经很多，不仅小鼠。大鼠、 豚鼠和家免等小动物已有无闲动物，而且狗、猫、猴。猪。山羊、绵羊和牛等大动物以及鸡、火鸡、鹌鹑、青蛙、蛇基至蚕、苍蝇。白蚊等也 都有了无菌动物。这些都是为了适应科学发展的需要而培育的，其中的小鼠、大鼠、豚鼠，国外一些发达国家已能大量生产，并比较方使地应 用于日常研究中了.已育成的无菌动物见表6.2 6-2已育成的无菌动物 种类 1946 1948: 195 nts,1959.Lkcy.1963 ard等.1965Miks,196 三、无菌动物的特征 只要饲科配备适当，无菌动物发育正常，外观和通动物相同，但是其机能、结构和通动物有很大的不同。无菌动物受两个因素影响 即微生物和因饲养比较聚集而致的肾上腺增大 无菌动物的特征主要反映在下面二个方面 (一）形态学改变 1。消化系统：主要变化在肠道 )无菌动物肠道肌层薄，更为特异的是言肠肥大，比普通动物要大56倍。无菌豚鼠的言肠可达体重的13。主要是由于肠壁薄、张力低而 增大，由于盲肠能大，肠壁菲薄，常因盲肠扭转或肠壁破裂而死亡。如给无苗动物注入梭状芽孢杆茵则可缩小盲肠体积。 ()肠粘膜绒毛增多. ()肝旺重量下降。 2。循环系统：心脏相对嬸小 3.血液系统：白细胞增加，昔通动物白细胞总数波动范围大，无闲动物白细胞数值恒定。 4。网状内皮系统：脾脏绪小，无三级滤泡，网状内皮细胞功能降低。 (仁)生理学改变 1。免疫功能：由于网状内皮系统、淋巴组织发育不良，淋巴小结内缺乏生发中心，产生丙种球重白的能力很弱（在检查无菌动物的无菌性 时，血清丙种球重白阴性可以作为无菌的一个辅助证据)，又因为体内无微生物和寄生虫，血中无抗体，血清杀菌力低，吞噬细胞噬菌力也 低，因此对微生物感染异常敏感，某些病原性弱和必须经腹腔或颅脑接种才能感染普通动物的微生物很容易感染无菌动物。 2.生长率：无菌条件下对不同种属影响不同。无菌鸟类生长率高于同种的苦通鸟类；无菌大小鼠与苦通鼠差不多；无菌豚鼠和无菌免生长 率比岩通者慢。因肠内无苗，不能帮助消化纤维素以提供机体所需要的营养。 3.生殖：无菌条件对动物的生殖影响不大。大鼠和小鼠因出生无感染身体较好：无菌豚鼠及免比普通者素殖力低，可能因大盲肠之故。 4。代谢：血中含氨量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比言通动物长 5,营养：与动物品种有关，豚鼠和免的肠道长，故有影响。无菌动物肠道上皮细胞更新率比一般动物低，肠壁的物质交换也较慢。无菌条 件下的各种动物通过阻汁排泄代谢产物的速率均减慢：如切除无菌动物的言肠，则无菌动物与昔通动物的差异缩小，无菌豚鼠和无菌免在切除 言肠后，其生殖率增加，关于言肠增大的原因，曾进行过许多研究，尚无明确结果，推测可能是因为饲料中的有毒物质刺激言肠，使其增大加 长、弹性减少.正常情况下饲料中的毒性物质可被肠道菌分解。无菌条件对免及豚鼠的言肠产生的影响最大，Sab0u少曾称量过无闲豚鼠的言 肠（连同肠内容物），结果盲肠相当于豚鼠体重的1V3。 6.寿命：无苗大鼠和小鼠比言通者长寿： 自1946年开始培育无菌动物，1959年宫川用不锈钢做隔离器的主体部分，并附有小的玻璃观察窗和灵敏的机械手，使不锈钢隔离器达到比较完 善的地步。但这种隔离器既笨重造价又昂贵，不可能大量推广使用，因而也限制了无菌动物工作的开展。在日本现有24个单位从事无菌动物研 究工作，仅在东京就有9个无菌动物研究单位。50年代，发明了用过氧乙酸进行表面灭菌的方法以后，1957年P.C.Trexler在美国印第安那州圣 母大学Lobund研究室里创造了塑料膜隔离器，用无毒聚氯乙烯薄膜制造隔离器的主体部分。由于这类隔离器制作方便，既轻便又实用，所需用 费用又不高，仅为不锈钢隔离器的几十分之一，灭菌方法也大为简便，因此日渐广泛地得到应用，促进了无菌动物研究的发展。 1978年Lobund研究室的Morris Pollard博士来华讲学时给我国赠送了一具Trexler隔离器，中国医科院动物中心已仿制成功，上海、苏州 等地也已制作成功，并已小批量生产。近二年来，Trexler教授亲自来华讲学，传授隔离器和无菌动物饲养繁殖技术，促进了我国无菌动物研究 的发展。现在北京、上海等地已有几个单位在研究无菌动物。 此外，澳大利亚、比利时、西德、苏联、捷克、英国、法国、意大利等国和地区，都已建立了包括无菌动物在内的实验动物中心。 对无菌动物的研究最初只是为了探讨高等动物与体内微生物之间的关系。19世纪末,Nattal氏及Thierfelder氏用剖腹术取出了妊娠豚鼠的胎 儿，在无菌环境下饲养了10天。随后，Schettelus发现鸡的胚胎是无菌的，后来成功地进行了雏鸡的无菌化。无菌动物所具有的独特优越性使 其成为一种新型的实验动物。随着生物学的进步和技术的发展，试行了各种动物的无菌化，现在无菌动物的品种已经很多，不仅小鼠、大鼠、 豚鼠和家兔等小动物已有无菌动物，而且狗、猫、猴、猪、山羊、绵羊和牛等大动物以及鸡、火鸡、鹌鹑、青蛙、蛇甚至蚕、苍蝇、白蚁等也 都有了无菌动物。这些都是为了适应科学发展的需要而培育的，其中的小鼠、大鼠、豚鼠，国外一些发达国家已能大量生产，并比较方便地应 用于日常研究中了。已育成的无菌动物见表6-2。 表6-2 已育成的无菌动物 种 类 培育者及育成时间 小 鼠 Pleasants,1959 大 鼠 Reyniers等，1946:Gustafsson,1948;Pleasants,1959 豚 鼠 Miyakawa等,1958;Tanami,1959;Pnillips等,1959;Horton和Hickey,1961;Newton和Dewitt,1961 兔 Wostmann和Pleasants,1959;Luckey,1963 狗 Glimsedt,1946 猫 Bleby,1969 山羊、绵羊 Smith,1961,1966 猪 Whitenair,等,1960 马 驹 Drummond等,1973 猴 Reyniers,1942 鸡 Reyniers,1943 鹌 鹑 Woodard等,1965;Miles,1966 三、无菌动物的特征 只要饲料配备适当，无菌动物发育正常，外观和普通动物相同，但是其机能、结构和普通动物有很大的不同。无菌动物受两个因素影响， 即微生物和因饲养比较聚集而致的肾上腺增大。 无菌动物的特征主要反映在下面二个方面 （一）形态学改变 1．消化系统：主要变化在肠道 ⑴无菌动物肠道肌层薄，更为特异的是盲肠肥大，比普通动物要大5-6倍。无菌豚鼠的盲肠可达体重的1/3。主要是由于肠壁薄、张力低而 增大。由于盲肠膨大，肠壁菲薄，常因盲肠扭转或肠壁破裂而死亡。如给无菌动物注入梭状芽孢杆菌则可缩小盲肠体积。 ⑵肠粘膜绒毛增多。 ⑶肝脏重量下降。 2．循环系统：心脏相对缩小。 3．血液系统：白细胞增加。普通动物白细胞总数波动范围大，无菌动物白细胞数值恒定。 4．网状内皮系统：脾脏缩小，无三级滤泡，网状内皮细胞功能降低。 （二）生理学改变 1．免疫功能：由于网状内皮系统、淋巴组织发育不良，淋巴小结内缺乏生发中心，产生丙种球蛋白的能力很弱（在检查无菌动物的无菌性 时，血清丙种球蛋白阴性可以作为无菌的一个辅助证据），又因为体内无微生物和寄生虫，血中无抗体，血清杀菌力低，吞噬细胞噬菌力也 低，因此对微生物感染异常敏感，某些病原性弱和必须经腹腔或颅脑接种才能感染普通动物的微生物很容易感染无菌动物。 2．生长率：无菌条件下对不同种属影响不同。无菌鸟类生长率高于同种的普通鸟类；无菌大小鼠与普通鼠差不多；无菌豚鼠和无菌兔生长 率比普通者慢。因肠内无菌，不能帮助消化纤维素以提供机体所需要的营养。 3．生殖：无菌条件对动物的生殖影响不大。大鼠和小鼠因出生无感染身体较好；无菌豚鼠及兔比普通者繁殖力低，可能因大盲肠之故。 4．代谢：血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长。 5．营养：与动物品种有关，豚鼠和兔的肠道长，故有影响。无菌动物肠道上皮细胞更新率比一般动物低，肠壁的物质交换也较慢。无菌条 件下的各种动物通过胆汁排泄代谢产物的速率均减慢；如切除无菌动物的盲肠，则无菌动物与普通动物的差异缩小。无菌豚鼠和无菌兔在切除 盲肠后，其生殖率增加。关于盲肠增大的原因，曾进行过许多研究，尚无明确结果。推测可能是因为饲料中的有毒物质刺激盲肠，使其增大加 长、弹性减少。正常情况下饲料中的毒性物质可被肠道菌分解。无菌条件对兔及豚鼠的盲肠产生的影响最大，Sabourdy曾称量过无菌豚鼠的盲 肠（连同肠内容物），结果盲肠相当于豚鼠体重的1/3。 6．寿命：无菌大鼠和小鼠比普通者长寿