上海师范大学学报(自然科学版)J. Shanghai Normal univ.(Nat.Sci.)2019年 ly increased the content of soluble sugar, soluble protein, titratable acid and ascorbic acid in tomato fruit. This showed that watering the biological fertilizer S3-1 could effectively improve the quality of tomato fruit. Then, we plated coating of tomato cially bacteria. What's more, the rate of change was three times higher than that of the control group. After using S3-1 biologic fertilizer, the dry weight and root length of the plants didn't change significantly. The further studies had shown that S3-1 biofertili zer significantly reduces theurease activity of soil. However, it had no significant effect on thesucrase activity of soil. Key words: Bacillus telezensis: Pseudomonas chlororaphis subsp. aurantiaca; bacteria strain property; quality of fruit; soil enzyme activity 引言 西红柿(Lyα copersicon esculentum Mⅲl)栽培广泛,且随着蔬菜种植业的发展,其种植面积还在不断扩 大,生产效益显著[-21.施用化肥能够有效地提升西红柿的产量,但是过度施用也会造成土壤的酸、碱 化,破坏土壤微生物区系和自然农业的生态系统.微生物肥料是一种含有相应活性微生物的生物制剂, 具有无毒、无污染的特性,具有广阔的应用前景3 芽孢杆菌(Bα cillus)具有良好的促生能力,可通过浸种、浇施、灌根等多种方法在多种蔬菜、果树和 作物上使用解淀粉芽孢杆菌Sneb709能有效地促进西红柿果实的质量4;以芽孢杆菌为主要成分的仙 丰168经过200倍稀释,能有效提升西红柿的株高口;解淀粉芽孢杆菌B1619则提升了西红柿幼苗的株 高、鲜重、干重等.但贝莱斯芽孢杆菌( Bacillus velezensis)对于西红柿的促生影响以及对土壤酶活性的 影响还鲜有报道 假单胞菌(P3 seudomonas)是一类重要的土壤微生物,其在不同的土壤微生物群落中的占比为1% 4%,同时也是一类重要的植物根际促生菌(PGPR),常作为生防细菌以及促生细菌来使用6-7.现阶段 假单胞菌的促生作用主要集中在小麦、蒌蒿、蘑菇∽等作物上,关于其对西红柿的影响的硏究则侧重 于病害防治方面,而关于其对西红柿的促生能力的报道较少 本实验研究了两株菌株贝莱斯芽孢杄菌(B.τ elezensis)S3-l与桔黄假单胞菌( Pseudomonas chlororaphis subsp. aurantiaca)JD37对于西红柿品质以及土壤酶活性的影响之间的差异,希望为后续的 微生物肥料的制备与应用提供理论依据. 1材料与方法 1.1实验材料 西红柿S1802幼苗由上海师范大学种质资源中心提供,贝莱斯芽孢杆菌S3-1(B. velezensis)与桔黄 假单胞菌JD37(P. chlororaphis subsp. aurantiaca)由上海师范大学微生物与分子生物学实验室保藏 实验试剂包括:铬天青S( Chromeazurol S)固体平板,NBRP溶磷固体培养基,ADF培养基,无菌脱 脂牛奶培养基, salkowski试剂,Luia- Bertani(LB)液体培养基, Kings medium B(KMB)液体培养基,高氏 号培养基,孟加拉红培养基,牛肉膏蛋白胨(NB)培养基. 1.2菌种性质鉴定[0 将4℃下保藏在平皿中的S3-1与JD37分别接种至LB液体培养基与KMB液体培养基中,活化 24h后得到种子液接种至新的LB与KMB培养基中再培养24h后得到发酵液,用移液枪小心地吸取 1μuL发酵液点于CAS固体平板、NBRP溶磷固体培养基上,观察其是否是产铁载体和其溶磷的能力. 将上述溶液进行梯度稀释后吸取100μL均匀地涂布在ADF培养基(培养基现配现用,无法加热重 复使用)中,若干天后观察是否有菌落产生上海师范大学学报!自然科学版" ,'230/4305(%.60&7/58'!(0;'2=5'" #)*+ 年 :54/515=0/;&<5/=.90:9T ;39=%/;9/;%1:%&-V&9:-40.#:%&-V&9?.%;95/#;5;.0;0V&90=5T 0/T 0:=%.V5=0=5T 5/ ;%60;%1.-5;'X35::3%W9T ;30;W0;9.5/4;39V5%&%45=0&19.;5&5Q9.2CK* =%-&T 9119=;589&<56?.%89;39Y-0&5;<%1;%60;%1.-5;'X39/#W9?&0;9T =%0;5/4%1;%60;% .35Q%:?39.9:%5&'g91%-/T ;30;2CK* W0:9119=;5895/ V&%=i5/46%.965=.%%.40/5:6:1.%69/;9.5/4;39.35Q%:?39.9%1?&0/;:#9:?9K =50&&<V0=;9.50'g30;q:6%.9#;39.0;9%1=30/49W0:;3.99;569:35439.;30/ ;30;%1;39=%/;.%&4.%-?'>1;9.-:5/42CK* V5%&%45=0& 19.;5&5Q9.#;39T.<W9543;0/T .%%;&9/4;3 %1;39?&0/;:T5T/q;=30/49:54/515=0/;&<'X391-.;39.:;-T59:30T :3%W/ ;30;2CK* V5%19.;5&5K Q9.:54/515=0/;&<.9T-=9:;39-.90:90=;585;<%1:%5&'P%W989.#5;30T /%:54/515=0/;9119=;%/ ;39:-=.0:90=;585;<%1:%5&' 92* 5/3).! S)HJDD2QYKDKWK=QJQ% CQK25P?P=)QHXDP<P<)MXJQ:-V:?')2<)="J)H)% V0=;9.50:;.05/ ?.%?9.;<% Y-0&5;<%11.-5;% :%5&9/Q<690=;585;< ) 引 言 西红柿!;FHPMK<QJHP= KQH2DK="2?L5&&'"栽培广泛#且随着蔬菜种植业的发展#其种植面积还在不断扩 大#生产效益显著'* F#( '施用化肥能够有效地提升西红柿的产量#但是过度施用也会造成土壤的酸)碱 化#破坏土壤微生物区系和自然农业的生态系统'微生物肥料是一种含有相应活性微生物的生物制剂# 具有无毒)无污染的特性#具有广阔的应用前景'C( ' 芽孢杆菌!S)HJDD2Q"具有良好的促生能力#可通过浸种)浇施)灌根等多种方法在多种蔬菜)果树和 作物上使用'解淀粉芽孢杆菌 2/9VH)+ 能有效地促进西红柿果实的质量'!( %以芽孢杆菌为主要成分的仙 丰 *D" 经过 #)) 倍稀释#能有效提升西红柿的株高'*( %解淀粉芽孢杆菌 f*D*+ 则提升了西红柿幼苗的株 高)鲜重)干重等'G( '但贝莱斯芽孢杆菌!S)HJDD2QYKDKWK=QJQ"对于西红柿的促生影响以及对土壤酶活性的 影响还鲜有报道' 假单胞菌!CQK25P?P=)Q"是一类重要的土壤微生物#其在不同的土壤微生物群落中的占比为 *[ c C![#同时也是一类重要的植物根际促生菌!hMh\"#常作为生防细菌以及促生细菌来使用'D FH( '现阶段 假单胞菌的促生作用主要集中在小麦)蒌蒿'"( )蘑菇'+( 等作物上#关于其对西红柿的影响的研究则侧重 于病害防治方面#而关于其对西红柿的促生能力的报道较少' 本实验 研 究 了 两 株 菌 株 贝 莱 斯 芽 孢 杆 菌 ! S3YKDKWK=QJQ" 2CK* 与 桔 黄 假 单 胞 菌 ! CQK25P?P=)Q HXDP<P<)MXJQ:-V:?')2<)="J)H)",@CH 对于西红柿品质以及土壤酶活性的影响之间的差异#希望为后续的 微生物肥料的制备与应用提供理论依据' * 材料与方法 ;F; 实验材料 西红柿 2*"K)# 幼苗由上海师范大学种质资源中心提供#贝莱斯芽孢杆菌 2CK*!S3YKDKWK=QJQ"与桔黄 假单胞菌 ,@CH!C3HXDP<P<)MXJQ:-V:?3)2<)="J)H)"由上海师范大学微生物与分子生物学实验室保藏' 实验试剂包括$铬天青 2!S3.%690Q-.%&2"固体平板#(f\Bh溶磷固体培养基#>@m培养基#无菌脱 脂牛奶培养基#:0&i%W:i5试剂#R-.50Kf9.;0/5!Rf"液体培养基#o5/4:L9T5-6f!oLf"液体培养基#高氏 一号培养基#孟加拉红培养基#牛肉膏蛋白胨!(f"培养基' ;F< 菌种性质鉴定&*) F**' 将 ! x下保藏在平皿中的 2CK* 与 ,@CH 分别接种至 Rf液体培养基与 oLf液体培养基中#活化 #! 3后得到种子液'接种至新的 Rf与 oLf培养基中再培养 #! 3 后得到发酵液#用移液枪小心地吸取 * $R发酵液点于 S>2 固体平板)(f\Bh溶磷固体培养基上#观察其是否是产铁载体和其溶磷的能力' 将上述溶液进行梯度稀释后吸取 *)) $R均匀地涂布在 >@m培养基!培养基现配现用#无法加热重 复使用"中#若干天后观察是否有菌落产生' *+