第七章 附录 一、培养液和常用试剂配制 (一)细胞培养常用试剂 1.RPWI-1640培养液 取RP-1640粉一袋(10.4g),溶于1000L双蒸水中，摇匀，充分 溶解后，取灭菌过滤器过滤，分装在500L葡萄糖瓶中，4℃冰箱保存备用。 (培养液呈玫瑰红色)。 同时可配制使用培养液，配置比例如下： RPMI-1640 8 ml 小牛血清 2 mL pH7.2 0.4 双抗 0.1ml 平均分装于2个链霉素小瓶中，每瓶5 2.Hanks液 原液A: NaCl 160g KCI 8g MgS0. MgClz.6H-O 2g 依次溶于800mL双蒸水中，制备成① CaCl22.8g溶于100mL双蒸水中，制备成② 将①和②液混合后加双蒸水至1000ml,再加氯仿2mL,4℃冰箱保存： 也可不加氯仿，高压灭菌，121℃，15分钟，冷却后放于冰箱保存。 原液B: Na-HPO.12H-O 3.04g KH-PO. 1.2g 葡萄糖 20g 依次溶于800mL双蒸水中，制备成① 酚红0.4g溶于100mL双蒸水中，制备成② 将①和②液混合后加双蒸水至1000m,再加氯仿2mlL,4℃冰箱保存： 也可不加氯仿，高压灭菌，121℃，15分钟，冷却后放于冰箱保存。 使用时按原液A一份，原液B一份和双蒸水18份的比例，配成Hanks 液。将使用也高压灭菌，121℃，15分钟，冷却后放于冰箱保存。 3.D-Hanks液（无钙、镁Hanks液） NaCl 8.0g第七章 附录 一、培养液和常用试剂配制 （一）细胞培养常用试剂 1. RPMI-1640 培养液 取 RPMI-1640 粉一袋（10.4g），溶于 1000mL 双蒸水中，摇匀，充分 溶解后，取灭菌过滤器过滤，分装在 500 mL 葡萄糖瓶中，4℃冰箱保存备用。 （培养液呈玫瑰红色）。 同时可配制使用培养液，配置比例如下： RPMI-1640 8 mL 小牛血清 2 mL pH 7.2 PHA 0.4 mL 双抗 0.1 mL 平均分装于 2 个链霉素小瓶中，每瓶 5 mL。 2. Hanks 液 原液 A： NaCl 160g KCl 8g MgSO4 2g MgCl2.6H2O 2g 依次溶于 800mL 双蒸水中，制备成① CaCl2 2.8g 溶于 100mL 双蒸水中，制备成② 将①和②液混合后加双蒸水至 1000mL，再加氯仿 2mL，4℃冰箱保存； 也可不加氯仿，高压灭菌，121℃，15 分钟，冷却后放于冰箱保存。 原液 B： Na2HPO4.12H2O 3.04g KH2PO4 1.2g 葡萄糖 20g 依次溶于 800mL 双蒸水中，制备成① 酚红 0.4g 溶于 100mL 双蒸水中，制备成② 将①和②液混合后加双蒸水至 1000mL，再加氯仿 2mL，4℃冰箱保存； 也可不加氯仿，高压灭菌，121℃，15 分钟，冷却后放于冰箱保存。 使用时按原液 A 一份，原液 B 一份和双蒸水 18 份的比例，配成 Hanks 液。将使用也高压灭菌，121℃，15 分钟，冷却后放于冰箱保存。 3. D-Hanks 液（无钙、镁 Hanks 液） NaCl 8.0g