8免疫化学技术 8.1免疫化学技术简介 现代免疫化学是研究抗原与抗体的组成、结构以及抗原和抗体反应的机制。此外,还研 究体内其他免疫活性物质,如补体分子的组成、结构及其功能。目前,免疫化学已应用于免 疫性疾病发病机制的基础研究和临床检测等, 随着免疫化学、细胞生物学及分子生物学的进展,免疫学实验技术也迅猛发展,并已成 为当今生命科学研究的重要手段,尤其是在医学基础研究和临床实践中得到广泛应用 免疫学检测方法可分为体液免疫测定及细胞免疫测定。前者主要是根据抗原与相应抗体 能在体外发生特异性结合,并在一些辅助因子的参与下出现沉淀、凝集及溶解等反应,从而 采用已知抗原检测未知抗体,或用已知抗体检测未知抗原。此外,尚包括检测体液中各种可 溶性免疫分子,诸如补体、各类免疫球蛋白、循环免疫复合物、溶菌酶、各种细胞因子等 细胞免疫测定则是根据各种免疫细胞(T细胞、B细胞、K细胞、NK细胞及巨噬细胞等) 表面所具有的独特标志及其各自的特殊功能,在体外(有时亦可在体内)测定上述各种细胞 及其亚群的数量和功能,以帮助了解机体的细胞免疫水平。 本章节仅限于介绍几种主要的免疫化学实验技术的基本原理及实验操作方法 8.2抗原的免疫原性和专一性 抗原与兔疫原:抗原( antigen, Ag)是一类能刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应 答,并能与相应免疫应答产物即抗体和致敏淋巴细胞在体内或体外发生特异性结合的物质, 也称为免疫原( Immunogen)。前一种性能称为免疫原性( Immunogenicity)或抗原性 ( antigenicity),后一种性能称为反应原性( reactogenicity)或免疫反应性( Immunoreactivity) 抗原的分类:根据抗原物质所具备的性能可分为完全抗原( complete antigen)和半抗原 ( hapten)两类。同时具有免疫原性和免疫反应性的抗原称为完全抗原,如细菌、病毒、异 种动物血清等。仅具有与相应抗原或致敏淋巴细胞结合的免疫反应性,而无免疫原性的物质 称为半抗原,如大多数的多糖、类脂及一些简单的化学物质,它们本身不具免疫原性,但当 与蛋白质大分子结合后形成复合物,便获得了免疫原性,这种与半抗原结合并赋予它免疫原 性的蛋白质大分子称为载体( carrier)。根据抗原的来源不同可分为外源性抗原与内源性抗 原。外源性抗原是从外界引入体内而刺激机体发生免疫应答的。内源性抗原是指体内的自身 成分,如机体的组织或细胞因理化因素作用或病毒感染使这些成分发生改变或修饰,成为一 种自身抗原或称新生抗原,使机体发生免疫反应。而根据抗原的化学组成可分成蛋白质、糖 类、脂类与核酸等抗原153 8 免疫化学技术 8.1 免疫化学技术简介 现代免疫化学是研究抗原与抗体的组成、结构以及抗原和抗体反应的机制。此外，还研 究体内其他免疫活性物质，如补体分子的组成、结构及其功能。目前，免疫化学已应用于免 疫性疾病发病机制的基础研究和临床检测等。 随着免疫化学、细胞生物学及分子生物学的进展，免疫学实验技术也迅猛发展，并已成 为当今生命科学研究的重要手段，尤其是在医学基础研究和临床实践中得到广泛应用。 免疫学检测方法可分为体液免疫测定及细胞免疫测定。前者主要是根据抗原与相应抗体 能在体外发生特异性结合，并在一些辅助因子的参与下出现沉淀、凝集及溶解等反应，从而 采用已知抗原检测未知抗体，或用已知抗体检测未知抗原。此外，尚包括检测体液中各种可 溶性免疫分子，诸如补体、各类免疫球蛋白、循环免疫复合物、溶菌酶、各种细胞因子等。 细胞免疫测定则是根据各种免疫细胞（T 细胞、B 细胞、K 细胞、NK 细胞及巨噬细胞等） 表面所具有的独特标志及其各自的特殊功能，在体外（有时亦可在体内）测定上述各种细胞 及其亚群的数量和功能，以帮助了解机体的细胞免疫水平。 本章节仅限于介绍几种主要的免疫化学实验技术的基本原理及实验操作方法。 8.2 抗原的免疫原性和专一性 抗原与免疫原：抗原（antigen,Ag）是一类能刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应 答，并能与相应免疫应答产物即抗体和致敏淋巴细胞在体内或体外发生特异性结合的物质， 也称为免疫原（immunogen）。前一种性能称为免疫原性（immunogenicity）或抗原性 （antigenicity），后一种性能称为反应原性（reactogenicity）或免疫反应性（immunoreactivity）。 抗原的分类：根据抗原物质所具备的性能可分为完全抗原（complete antigen）和半抗原 （hapten）两类。同时具有免疫原性和免疫反应性的抗原称为完全抗原，如细菌、病毒、异 种动物血清等。仅具有与相应抗原或致敏淋巴细胞结合的免疫反应性，而无免疫原性的物质 称为半抗原，如大多数的多糖、类脂及一些简单的化学物质，它们本身不具免疫原性，但当 与蛋白质大分子结合后形成复合物，便获得了免疫原性，这种与半抗原结合并赋予它免疫原 性的蛋白质大分子称为载体（carrier）。根据抗原的来源不同可分为外源性抗原与内源性抗 原。外源性抗原是从外界引入体内而刺激机体发生免疫应答的。内源性抗原是指体内的自身 成分，如机体的组织或细胞因理化因素作用或病毒感染使这些成分发生改变或修饰，成为一 种自身抗原或称新生抗原，使机体发生免疫反应。而根据抗原的化学组成可分成蛋白质、糖 类、脂类与核酸等抗原