1.单光束分光光度计 其光路示意图如前面的图27所示,经单色器分光后的一束平行光,轮流通过参比溶液和 样品溶液,以进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单,操作方便,维修容易,适 用于常规分析.国产722型、751型、724型、英国SP500型以及 Backman Du-8型等均属于 此类光度计 2.双光束分光光度计 其光路示意于图28,经单色器分光后经反射镜(M)分解为强度相等的两束光,一束通 过参比池,另一束通过样品池.光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射 光经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计般都能 自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池还能自动消除光源强度 变化所引起的误差。这类仪器有国产710型、730型和740型等 转装置 光源 光电倍增管 样品池 图28单波长双光束分光光度计原理图 M,M2,M,M4一反射镜 3.双波长分光光度计 其基本光路如图29所示,由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到 单色器 光源 捡测器 单色器 切光器吸收池 图29双波长分光光度计光路示意图 两束不同波长(x1和入2)的单色光;利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池 然后经过光电倍增管和电子控制系统,最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值 △A(△A=A1,-A4,对于多组分混合物混浊试样(如生物组织液)分析,以及存在背景干扰或 共存组分吸收干扰的情况下,利用双波长分光光度法,往往能提高方法的灵敏度和选择性 利用双波长分光光度计,能获得导数光谱。通过光学系统转换,使双波长分光光度计能很方 便地转化为单波长工作方式,如果能在1和x2处分别记录吸光度随时间变化的曲线,还能进 行化学反应动力学研究 (三)分光光度计的校正 通常在实验室工作中,验收新仪器或仪器使用过一段时间后都要进行波长校正和吸光度校