生物化学:蛋白质化学 山农大生物化学与分子生物学系 第7页共20页 因为等电点时,[R’]=[R] 所以 IR JH K2IR] H+ [H]=K1′ ·K9 方程两边求负对数 则 H K1+pK2 因为等电点时p=pI 所以 pI=-(pkI+pK2) 可以由手册查得各种AA的pK和pK,代入上式即得AA的等电点 3、多氨基(碱性氨基酸)和多羧基(酸性氨基酸)氨基酸的解离 解离原则:先解离a-C00H,随后其他-COOH;然后解离a-NH,随后其他-NH 总之羧基解离度大于氨基,α-C上基团大于非α-C上同一基团的解离度。 等电点的计算:首先写出解离方程,两性离子左右两端的表观解离常数的对数的算 术平均值。一般PI值等于两个相近RK值之和的一半。 如天冬氨酸 赖氨酸 4、氨基酸的酸碱滴定曲线 以甘氨酸为例,滴定曲线P33 1摩尔甘氨酸溶于水时,溶液PH为5.97,分别用标准NaOH和HCL滴定,以溶 液PH值为纵坐标,加入HCL和NaOH的摩尔数为横坐标作图,得到滴定曲线。该曲 线一个十分重要的特点就是在PH=2.34和PH=9.60处有两个拐点,分别为其PK和 PK。 规律:pH<pK1时,[R']>[R>[R] pB>pK2时,[R]>[R]>[R+]; pHpI时,净电荷为零,[R’]=[R] pKpI时,净电荷为“+”; p>pI时,净电荷为“ 7生物化学: 蛋白质化学 山农大生物化学与分子生物学系 第 7 页 共 20 页 7 因为等电点时，[R+ ]=[R- ] 所以 [H+ ]2 =K1ˊ·K2ˊ 方程两边求负对数 则 因为等电点时 pH = pI 所以 可以由手册查得各种 AA 的 pK 和 pK，代入上式即得 AA 的等电点。 3、多氨基（碱性氨基酸）和多羧基（酸性氨基酸）氨基酸的解离 解离原则：先解离α-COOH，随后其他-COOH；然后解离α-NH3 + ，随后其他-NH3 + 总之羧基解离度大于氨基，α-C 上基团大于非α-C 上同一基团的解离度。 等电点的计算：首先写出解离方程，两性离子左右两端的表观解离常数的对数的算 术平均值。一般 PI 值等于两个相近 PK 值之和的一半。 如天冬氨酸 赖氨酸 4、氨基酸的酸碱滴定曲线 以甘氨酸为例，滴定曲线 P33 1 摩尔甘氨酸溶于水时，溶液 PH 为 5.97，分别用标准 NaOH 和 HCL 滴定，以溶 液 PH 值为纵坐标，加入 HCL 和 NaOH 的摩尔数为横坐标作图，得到滴定曲线。该曲 线一个十分重要的特点就是在 PH=2.34 和 PH=9.60 处有两个拐点，分别为其 PK 和 PK。 规律：pH<pK1 ′ 时,[R+ ]>[R± ]>[R- ]; pH>pK2 ′ 时，[R- ]>[R±]>[R+]; pH=pI 时，净电荷为零，[R+ ]=[R- ]; pH<pI 时，净电荷为“+”； pH>pI 时，净电荷为“-”。 + ± + ± = H K R K R H 2 [ ] 1 [ ][ ] / / ( 1 2 ) 2 1 / / pH = pK + pK ( 1 2 ) 2 1 / / pI = pK + pK